第六章细菌感染检查方法和防治原则.pptVIP

不染色标本的检查主要用于检查在生活状态下细菌的动力及其运动情况。 * * PCR:一种无细胞的分子克隆 技术，能在体外将一个基因或 一段DNA 序列经过多次循 环的DNA复制，在数小时内扩 增上百万倍。既便于基因诊断，又利于研究。 死疫苗：百日咳，为了维持血清抗体水平，常需多次接种，剂量较大，接种后局部和全身反应较明显，只激发体液免疫应答。 活疫苗：BCG，在宿主体内短暂生长和增殖，类似于轻症或隐性感染。有利于提高免疫能力和记忆性免疫细胞的生成。只接种一次，用量小。副作用轻，免疫效果好，免疫力持久。可产生体液免疫和细胞免疫。最大的缺点是病原微生物可能出现毒力回复，对于有免疫缺陷的机体，接种活疫苗可能引起感染或并发症。 亚单位疫苗：利用微生物的保护性抗原制成的不含核酸/能诱发机体产生免疫应答的疫苗。如肺炎双球菌的荚膜多糖。无毒性，可避免毒力回复。 基因工程疫苗：利用基因工程技术把编码病原体保护性抗原表位的目的基因导入原核和真核表达系统后，用表达的保护性抗原所制成的疫苗。但技术要求高，抗原回收和纯化较困难。 重组载体疫苗：将编码某一蛋白抗原的基因转入减毒的病毒或细菌制成的疫苗。痘病毒和腺病毒是常用的载体。 核酸疫苗：将编码保护性抗原的基因重组到质粒真核表达载体上，然后将重组的质粒DNA直接注射到宿主体内，外源基因在体内所表达的抗原能刺激机体产生免疫应答。人们担心外源DNA整合到宿主染色体中而激活癌基因和影响抑癌基因的表达，导致细胞恶性转化。 转基因植物疫苗 * 细菌感染的检查方法与防治原则 Diagnosis and control for bacterial infection 一、病原菌检测 避免杂菌污染 注意保存 不同期不同标本 用抗菌素以前 采集病变明显部位 及时送检 第一节 细菌感染的实验室诊断 （一） 标本的采集和送检 （二）病原菌的检查程序 形态学检查 初步诊断 分离培养 生物化学 血清学试验 动物试验 药敏试验 明确诊断 其他检测法 抗原检测 形态学检查 染色镜检:革兰染色(Gram stain),抗酸染色( acid-fast stain); 2.分离培养(isolation and cultivation): 诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术。 病原菌的分离培养：菌落 大小、形态、颜色、表面性状、透明度、溶血性 3.生化检测: 针对一个细菌菌落或纯培养物进行鉴定。 糖发酵试验 H2S试验 枸橼盐试验 4.抗原检测:用已知抗体检测未知细菌抗原，进行群和型的鉴别。 有玻片凝集、EIA、IF、Western blotting等试验。 ELISA direct indirect Fluorescence Microscopy 5.动物实验 常用动物 　小鼠、豚鼠、家兔 接种途径 　皮内、皮下、腹腔、静脉　 　脑内、鼻腔、灌胃　 6.药物敏感试验 方法：纸碟法、试管法、 小杯法和凹孔法 最低抑菌浓度(MIC) 最低杀菌浓度(MBC) 7. 核酸的检测 核酸杂交 多聚酶链反应 (PCR) 基因芯片(gene chips) 原 理 二、血清学诊断 双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期血清中抗体效价升高≥4倍者方有意义。 种 类 用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。(抗原→未知抗体) 标 本 凝集试验：肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等； 沉淀试验：梅毒VDRL、RPR试验等； 中和试验：抗“O”试验等； 补体结合试验：Q热柯克斯体抗体检测等。 细菌感染的实验诊断方法 第二节 细菌感染的特异性预防 一、人工主动免疫：将抗原性物质（疫苗或类毒素）接种于人体，刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答。 （一）疫苗:死疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗、基因 工程疫苗、重组载体疫苗、核酸疫苗 （二）类毒素(toxoid)：外毒素经0.3-0.4%甲醛处理后， 失去毒性仍保持抗原性的生物制品。 二、人工被动免疫：注射含有特异性抗体的免疫血清 或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂。 抗毒素 血清丙种球蛋白 其他免疫制剂：IFN-γ，CSF等。 区别点 死疫苗 活疫苗 制剂特点 死菌，保留免疫原性 减毒或无毒株 接种剂量与次数 量较大，2~3次 量较小，1次 保存及有效期 易保存，4℃约1年以上 不易保存，4℃存活2周 免疫效