环境细颗粒物所致大鼠肺损伤与连花清瘟拮抗作用实验-研究.pdf

研究论文 与急诊和门诊患者数量增多有显著关系【4】。环境雾霾发生期间各种呼 吸道疾病如上气道炎症、支气管哮喘、急性气管炎、刺激性干咳、 呼吸困难、鼻塞、流涕、喉部刺激等患者增加，或者原有的症状较 前加重，老年人和儿童患病的比例明显增高。殷永文等报道，2009 年上海市发生雾霾期间，在上海市6所大中型医院进行统计后发现， 日门诊量增加1．9％。而且空气细颗粒物污染对医院门诊量的滞后累 积性影响大于当日影响，在细颗粒物污染发生第6天时累积影响达到 染居民呼吸系统疾病(如急性气管炎、肺部感染、AECOPD等)门 诊量显著增多，而且大多数疾病的滞后影响较为突出。流行病学研 究发现空气中细颗粒物的对数浓度每增加1个单位，慢阻肺的发病率 会增加1．68倍，呼吸道疾病出现症状的几率增加1．79倍r71。土耳其的 一项研究发现空气细颗粒物与支气管哮喘患者的住院率存在明显的 1 相关性，空气细颗粒物浓度每增N0ug／m3，支气管哮喘的住院率就 会增加18％【8]。流行病学研究显示，呼吸道疾病的病死率、易感人群 总病死率与大气中的PM2．5浓度升高存在密切关联【9‘111。西安市一项 大气细颗粒物污染与居民病死率的关系研究发现：空气细颗粒物与 多种呼吸道疾病、心脑血管疾病的病死率呈正相关。研究显示PM2．5 浓度每升高100ug／m3，呼吸道疾病、心血管疾病、冠状动脉粥样硬化 8．32％、 性疾病、中风、慢性阻塞性肺部疾病的病死率将分别增Dn 从2．1％增DnN3．75％t131。 连花清瘟胶囊主要成分为连翘，金银花，麻黄，杏仁，石膏， 板蓝根，绵马贯众，鱼腥草，广藿香，大黄，红景天，薄荷脑，甘 草。连翘、薄荷、麻黄外疏卫表，石膏、银花、板蓝根内清气热， 杏仁、鱼腥草排痈解毒，大黄泄肺通腑，红景天化瘀清肺、养阴益 气。从连花清瘟的组成成分来看，它符合中医治疗炎性疾病的特点， 研究论文 主要药理作用是：提高机体细胞免疫功能，增强机体抵抗力；抑制 气道炎症反应，对多种细菌有抑菌作用；降低病毒感染后的肺指数； 抑制病毒感染导致的肺部炎症，调节炎性因子的表达，调节免疫应 答。PM2．5对气道的危害主要表现为气道炎症，所以本研究选用连花 清瘟胶囊作为拮抗PM2．5危害的药物，在动物模型上验证其效果并初 步探讨保护机制。 本课题采用动物体内实验，染毒组经气管滴注PM2．5建立大鼠染 毒模型，各干预组通过向大鼠胃内灌注不同剂量连花清瘟进行干预 后，再经气管滴注PM2．5进行染毒，各组大鼠进行肺泡灌洗，并对肺 泡灌洗液和血清中氧化应激指标进行测定分析，用以研究PM2．5对大 鼠肺组织的氧化损伤，并对肺泡灌洗液中损伤的指标含量与血清中 对应指标含量的关系进行研究。在细颗粒物导致肺氧化损伤前提下， 观察不同剂量连花清瘟对细颗粒物致肺损伤的拮抗作用。 材料与方法 1材料 1．1主要仪器设备 紫外分光光度计 756MC上海精密仪器科学有限公司 Multiskan 酶标仪 Mk3芬兰 电子秤 JA3003上海精科天平 恒温水浴箱 SHH．W21．420北京金北德工贸有限公司 低温离心机 EBAl2R德国Hettich公司 不同取液量移液器 德国Eppendorf公司 20号大鼠灌胃针 上海 16号静脉留置针针套 1．2试剂和材料 生理盐水，3％戊巴比妥钠(上海试剂采购供应站)，连花清瘟胶 囊生药(石家庄以岭药业股份有限公司)，乳酸脱氢酶(LDH)、丙 (GSH．PX)试剂盒购自南京建成生物制剂有限公司。静脉输液器， 研究论文 一次性采血针，普通采血管，注射器，离心管等。 2方法 2．1环境细颗粒物的采集及悬液制备 2．1．1 PM2．5的采集 本研究所采用