《第九组免疫研讨》.pptVIP

免疫研讨 制作人：田栩屹 张桓侨 下一步的研究方向 TCR与记忆T细胞 在记忆T细胞发育的研究中，关于T细胞前体和记忆T细胞亚群的分化关系至今仍然不太清楚，而且形成和维持记忆状态的分子信号机制也有待研究。 记忆T细胞 记忆T细胞 《科学》（Science）杂志两篇必威体育精装版文章表明，记忆T细胞的发育可能更接近线性分化模型（linear differentiation model），而T细胞受体（T cell receptor, TCR）在其中可能具有重要作用。 T细胞受体 Teixeiro等人研究了记忆T细胞发育过程中T细胞受体（T-cell receptor, TCR）的作用。 他们构建了一种OT-I TCR转基因小鼠，其卵蛋白素（ovalbumin, OVA）特异性TCR在β链跨膜区域有一处点突变。表达突变性TCR的T细胞保留了识别OVA肽段并产生应答的能力，因此表达突变型和野生型TCR的CD8+ T细胞的早期应答是相似的。 T细胞受体 然而，当研究人员检测扩增、减少及记忆阶段的CD8+ T细胞应答时，表达突变型TCR的T细胞分化成为记忆T细胞的能力遭到破坏，也就是记忆T细胞的数量和产生二次应答的能力受到抑制。表达突变型TCR的T细胞可以识别抗原并在接受TCR刺激后产生某些早期应答信号，比如钙代谢作用。然而，突变型TCR不能够形成免疫突触（immunological synapse） T细胞受体 以上结果提示效应T细胞和记忆T细胞的分化所需的信号是相互独立的而且一定程度上由TCR信号决定。 T细胞受体 北大免疫系 葛青 全国临床免疫学术会议 记忆T细胞主要由初始T细胞接受外来抗原活化而来，但研究表明淋巴细胞减少所导致的T细胞增值也可以诱导记忆T细胞的形成。动物在新生期或接受放化疗后，外周淋巴细胞数量少，初始T细胞表面TCR与自身表位肽-MHC的相互作用介导细胞发生稳态扩增，继而分化并获得记忆T细胞的表型和功能。 TCR基因转染抗肿瘤 TCR基因转染能够有效促进T细胞识别肿瘤抗原后活化。经肿瘤抗原预先刺激的TCR基因转染T细胞将启动记忆性T细胞分化，在再次遭遇表达相同抗原的肿瘤细胞时发挥更为强烈的免疫效应。 方法 密度梯度离心法分离PBMC，重组TCR腺病毒感染T细胞，流式细胞术检测外源TCR表达效率。AFP表位肽刺激T细胞，流式细胞术检测TCR基因转染T细胞经抗原刺激后，记忆性T细胞标志分子表达。MTT法检测T细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。Annexin?V-PI双染法检测靶细胞凋亡比例。ELISA法检测T细胞作用于靶细胞后IFN-γ与IL-2分泌水平。 结论 重组腺病毒载体感染3?d后，外源TCR表达比例接近30%。特异性TCR基因转染可有效促进T细胞识别肿瘤抗原后活化，能够促进T细胞杀伤AFP+靶细胞，诱导靶细胞凋亡，并促进IFN-γ分泌。抗原预先刺激能够进一步增强TCR基因转染T细胞抗肿瘤免疫效应。 另外，文献中模型为淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）感染的小鼠，还可以以其他模型进行验证。 感谢聆听 Thanks for your attention