IL12重组载体的抗肿瘤作用　.doc

IL12重组载体的抗肿瘤作用 关键词】白细胞介素12遗传载体抗肿瘤药综述 细胞因子疗法为临床治疗肿瘤提供了一种安全可行的 方法，在目前肿瘤治疗中占有一定地位，已经展示出良好 的应用前景。在目前发现的细胞因子中，白细胞介素12 (IL?12)是对体内免疫活性细胞诱导和调节作用最强、范 围最广的一种细胞因子，是最有效的抗肿瘤细胞因子之一。 由于直接注射IL?12的副作用，介导IL?12基因转移进行 肿瘤基因治疗是近年的研究热点。近年来，其重组载体被 越来越多地应用于临床，使它的作用更好地得到了发挥。 本文就I L?12的分子结构特征、生物学功能、抗肿瘤作用 及IL ?12重组载体应用的研宄作一综述。 II L?12的分子结构特征 IL?12主要是由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等抗 原提呈细胞产生的一种异二聚体细胞因子，永生化的B细 胞、CD4+细胞、中性粒细胞和肥大细胞等也可产生IL? 12[1]。I L?1 2组成的两个亚基P4 0和P35分别由两个基因 编码，单独的P4 0和P35亚基均不能与IL?12受体结合。P 35在体内普遍表达，而P40的表达受各种刺激因素的调控， 只有两个基因共同表达才能组成有活性的IL?1 2,游离的 P40的二聚体蛋白是I L?12的天然抑制物。所以，在IL?12 的基因治疗中，近年来一般将P 35和P40融合连接成单链 基因片段，以保证二者的均衡表达。IL?12有种族特异性， 人I L?12在鼠中活性很小，鼠IL?12在人中则有活性，人 与鼠IL?1 2亚基氨基酸序列的比较显示，P4 0亚基比P3 5 亚基具有更高的保守性，P4 0亚基序列一致性为7 0%，相 似性为79 %; P35亚基序列一致性为60%,相似性为7 l%[2]o 2IL?1 2的生物学功能 I L?1 2对T细胞和N K细胞的作用 I L?12可明显刺激静止或激活的外周血T细胞、NK细 胞分泌IF N?y , IFN? 丫与IL?12有协同作用，但对于静止 的细胞需要辅助细胞的参与。IL?12 一方面能诱导T细胞和 NK细胞产生多种细胞因子，促进细胞毒性淋巴细胞增殖和 功能的活化；另一方面在和肿瘤抗原的共刺激下，还能诱 导特异性杀伤性T细胞（CTL ）的产生，该细胞被认为是杀 瘤作用最强的细胞。已发现IL?12能促进穿孔素和颗粒酶 的表达，增加胞浆内颗粒的产生，上调细胞表面表达多种 黏附分子和细胞因子受体[3]。 IL?1 2对Th 1/Th2的调节 I L?12促进Th细胞向Thl细胞分化，不但直接作用于 Thl细胞和其前体并产生I型细胞因子，如IL?2、IFN?y 和淋巴毒素（LT）等，还可以在肿瘤坏死因子（TNF?ct）和 I L?1协同作用下间接通过T细胞和NK细胞产生TN F? y而 实现［4］。在人和鼠，己证明IL?1 2是Th 1产生的必需因 子，能诱导早期辅助性T细胞分化为Thl,并促进Thl的增 殖。在体外当用过敏原作用于CD4 +细胞时，导致其生成T h2型细胞；当有IL ?12存在时，则生成Th 1型细胞，分泌 1叩？丫而不分泌11.?4。因此，IL?1 2和IL?4作用于CD4+ 细胞分别支持Thl和Th2细胞的分化［5］。 3IL712的抗肿瘤作用 大量动物实验和临床研究表明，IL?12能够明显抑制肿 瘤的生长和转移，延长荷瘤动物的生存时间。但对IL?12 抗肿瘤作用及其在不同肿瘤中的作用机制各家报道不同。 IL ?12介导的T细胞参与抗肿瘤作用 I L?12不仅可抑制新生肿瘤的生长，而且还可使已存 在的肿瘤消退，且其抗瘤活性依赖于剂量。K NUTSON等在 HER 2/neu抗原提呈T细胞的体外研究中发现，I L?12以量 效依赖的方式恢复抗原提呈的增殖。P77 6?790特异性T细 胞在IL?12和I L ?2刺激后更加容易与抗原发生反应，从 而发生增殖反应和分泌细胞因子（IFN?y和TNF ? a ）,这些 结果都提示I L?12在体外恢复和保持抗原提呈CD 4+T细胞 中发挥着重要的作用。同时也为C D4+T细胞在肿瘤过继治 疗中的应用提供了理论依据［6］。利用重组卡介苗和鼠IL ? 12增加Thl型细胞因子(包括IFN? 丫和IL?12)的分泌，诱 导瘤内CD4+/CD 8 +T细胞和NK细胞的浸润，从而可抑制C 3H/HeN小鼠体内肿瘤的增殖。这种抗肿瘤的效应与Thl淋 巴细胞和NK细胞介导的细胞毒性免疫反应相关［7］。 IL ?12通过提高NK细胞活性的抗肿瘤作用 在体外，IL?12可明显增加人外周淋巴细胞(P BMC)和 NK细胞的活性。可纠正各种实体肿瘤病人的PBM C中NK细 胞活性缺陷，在这些病人中用IL?12协同IL?2，可增加对 NK细胞敏感的和不敏感的肿瘤细胞的细胞毒