HPL法测定果汁中糖精钠含量的不确定度分析.doc

HPLC法测定果汁中糖精钠含量的不确定度分析 李玉萍（江门市新会区疾病预防控制中心广东江门529100） 】目的规范HPLC法测定果汁糖精钠含量的不确定度分析程序，使不确 定度评定合理。方法调节仪器最佳测定条件，测定果汁糖精钠溶液标准系列建 立工作曲线，并连续测量6次样品，获得未知样品糖精钠浓度，依据分析仪运用 工作软件自动建立工作曲线，读出被测样品浓度原理建立数学模型，分析HPLC法 测定果汁糖精钠含量的误差性质和来源,确定不确定度的主要因素，计算糖精钠 的测量不确定度。结果木法测定果汁中糖精钠含量为0.198g/Kg,扩展不确定度 U95=0.00507g/Kg（nU;eff=8）。结论根据分析仪器的测定数据输出方式建立数 学模型，进行不确定度评定，方法直观简明，与实际工作相符合。 关键词】HPLC糖精钠测量不确定度果汁 】R155.5 】B 】2095-1752 （2012） 15-0304-02 在实际仪器分析工作中，现代分析仪运用工作软件，自动建立工作曲线 读出被测样品浓度,木文据此原理建立数学模型［1］,进行了 HPLC法测定果汁中糖 精钠的不确定度分析［2、3］，现报告如下。 1材料与方法 1.1主要仪器与试剂 岛津CLASS-VP液相色谱仪，紫外检测器，C18色谱柱，超声波清洗器， 甲醇（色谱纯）。 1.2色谱条件 色谱柱：C18 色谱柱，250mmtimes;4.6mm 流动相：甲醇（色谱纯）+乙酸铵溶液=13+87 流速：l.Oml/min 检测波K::230nm 进样量:20ul 1.3标准物质 标准液用1.00plusmn;lmg/mL的糖精钠标样(中计量科学研究所)。 1.4测量方法简述 1.4.1称取5.000g样品，加入1+1氨水50ul摇匀，用水定容至50ml?移 入离心管中4000r/min离心5min,吸取上清液用微孔滤膜过滤。 1.4.2工作曲线：取5、10、25、50、100ul加纯水到1.00ml,含量分别 为 5、10、25、50、100ug/mLo 1.4.3滤液与标准系列各20ul注入色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的 保留吋间为依据定性，以其峰面积求出样品中糖精钠含量。 2测量数学模型 由公式：导出： u2rel (x) = u2 rel (I) +u2 rel (C 标)+ u2 rel (vl) + u2 rel (m) + u2 rel (A样) 4不确定度的分量计算 4.1线性拟合引起的不确定度分量u(l) 4.1.1标准曲线 数据见表1 表1 序号 糖精钠标准液测定的数据及分析 xl-x- 峰面积 标准溶液 (ug/mL) y0 (y0-y-)2 1 5 -33.00 335061 320456 213306025 2 10 -28.00 592059 5970013 25 -13.00 1427996 1426636 1849600 4 50 12.00  27885032809361 2788503 2809361 5 100 5584705 5574811 平均 38.00 135056164 62.00冋归方程y=55309x+43911，r=l, x-=38.00, n=5,回归直线的标准 偏差SR 自由度 nu;l=5-2=3 4.2标准物质的标准不确定度分量u(c标) 标准物质来自国家标准物质研宄中心，糖精钠标样浓度值为 1.00plusmn;lmg/mL，取置信水准 95%，k=2,贝有: u(c 标｝=1/2=0.5 (ug/mL) urel (C 标)=[u(c 标)/c 标]=0.5/100.0=0.5times;10-2 u2 rel (C 标)=(0.5times;10-2) 2=0.25times;10-4 自由度：nu;2=infin; 4.3容量体积的不确定度分量u (vl) 50ml容量瓶的最大允差为plusmn;0.02ml，即半宽度为 plusmn;0.02ml,属均匀分布，则容量瓶的标准不确定度为： u (v50) =0.02/=0.01155 (ml) urel (v50) =u(v50)/v50=0.01155/50=2.31times;10-4 u2 rel (v50) = (2.31times;10-4) 2=5.34times;10-8 100ml容量瓶的最大允差为0.1ml,即半宽度为0.1ml，属均匀 分布，则容量瓶的标准不确定度为： u (vlOO) =0.1/=0.058 (ml) urel (vlOO) =u(vl00)/vl00=0.058/100=5.8times;10-4 u2 rel (vlOO) = (5.8times;10-4) 2=3.3