HPL法测定法在不同产地药材陈皮中橙皮苷含量测量中的运用.doc

HPLC法测定法在不同产地药材陈皮中橙皮苷含量测量中的运用 目的：运用HPLC法测定法对不同产地药材 陈皮中橙皮苷含量进行测量。方法：应用Discovery C18色 谱柱，使用的流动相为甲醇、冰醋酸、水，彼此之间的比例 为35: 5: 60,通过检测最适宜的波长为283nm,最适宜的 流速应该是1. Oml/min。结果:橙皮苷处于21. 43-2143 U g/ml 之间时，拥有比较好的线性关系，平均回收率也非常高，迖 到了 98. 78%，结果表明，药材陈皮产地不同，橙皮苷含量也 有一定的区别。结论：运用PLC法来对不同产地药材陈皮中 橙皮苷含量测量具有非常突出的优势，简单快捷，具有非常 好的准确性，而且重复性也非常好，值得推广应用。 关键词：HPLC法；陈皮；橙皮苷；运用 我国多地都有种植陈皮，比如福建、广东等地。陈皮是 一味中草药，主要功能有理气健脾、燥湿化痰等，主要用来 治疗食少吐泻、胸闷等疾病。陈皮中最重要的成分就是橙皮 苷。很多研究者应用紫外分光光度法对陈皮中的橙皮苷进行 检测，效果不佳，尤其表现在专属性差。有报道称，运用HPLC 法测定陈皮中橙皮苷含量测量具有非常好的效果。为此本文 采用HPLC法，对来自于6种不同产地的陈皮中的橙皮苷进 行测定。 1仪器与试药 1.1仪器 美国，Discovery, C18 色谱柱（4. 6mmX250mm，5 u m）, 美国Water717,高效液相色谱仪器，紫外检测器为， SPD-lOAvp,美国梅特勒-托利多，AL204,分析天平（精确 度，O.OOOlg），郑州宏朗DZKW-D-6，型电热恒温水浴锅，济 宁万和，Model, C9860A,超声波清洗脱气机器，河北， DZF-6021,型真空干燥箱。 1.2试剂：甲醇溶液为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为 三蒸水。 1.3试药：橙皮苷对照组（购于中国药品生物制品检定 所，批号：130825-200921），6，批不同产地陈皮药材均购 于各地方的药材公司，经我当地药品检验所鉴定均为正品。 2方法与结果 2. 1色谱条件 应用Discovery C18色谱柱，将甲醇：冰醋酸：水=35: 5： 60,作为流动相，检测波长确定为283nm,流速确定为 1.0mL/min，色谱柱温度确定为25上°（3,进样量确定为20ML。 2.2溶液制备 2.2.1制备对照品溶液。运用天平称取5mg橙皮苷，该 对照品必须要经过P205,再通过室温减压，而后再进行干燥 24h才可使用，将对照品放入到25 uL容量瓶中，而后添加 甲醇溶液，待到指定刻度后，摇晃均匀，静置一段时间后， 即得到对照品溶液。选择应用精密仪器称取对照品溶液，共 5pL,而后将流动相溶液放入到25 uL容量瓶中，摇晃均匀， 静置一段时间后，过0.22pm滤膜，而后将其放到冰箱中， 冰箱温度为-20°C，储备起来以待日后应用。 2.2.2制备供试品溶液。将来自于福建、广东、四川、 广西、浙江、湖南等六地的药材陈皮分别放入到粉碎机中， 待到粉碎结束后，再将其放入到电热恒温干燥箱中，箱中温 度要迗到55°C,干燥时间为6h。应用相关仪器精密称取各 个产地陈皮粉碎品各2g，而后加入160 pL石油醚溶液，使 用超声仪器超声45min,将所有的石油醚过滤出来。待到药 渣挥干后，再加入到不同容量的甲醇溶液中，分别为60uL、 60uL、40 uL,再进行超声提取，共3次，每次45min。完 成过滤后，研究者需要将过滤液合并，待到甲醇溶液达到指 定要求的200 UL时，摇晃均匀，应用微孔滤膜进行过滤， 最后得到了供试品溶液，将其放到冰箱中备用，冰箱温度调 到-20°Co 2.3系统适应性研究 2.3. 1研究者需要根据制备供试品溶液的步骤进行制 备阴性对照液制备。 2.3.2系统适应性。依据上述要求的色谱条件，研究将 上述三种溶液进行精确提取，每个溶液各20uL。，供试品中 橙皮苷与相邻杂质分离度〉1. 5,阴性对照溶液与橙皮苷对照 品相同保留时间处未见色谱峰，认为不干扰实验测定结果。 理论塔板数按照橙皮苷峰计算不低于，3000。 2.4线性关系考察 按照对照品溶液，精密吸取对照品，溶，液，l.Oul、 2. 0 y 1、4. 0 u 1、6. 0 1、8. 0 u 1、lO.Oul、12. 0 u K 14. Oub 16. Oub 20. Oul,进样量为，20. Oul,不足， 20ul,体积均采用流动相溶液进行补充，分别注入高效液 相色谱仪器中，按照色谱条件进行测定，记录峰面积，以峰 面积作为纵坐标（Y），橙皮苷进样浓度作为横坐标（X），绘 制线性关系方程，得线性回归方程为： Y=1.8069X106X+l. 8056X104, （r, =0. 9996），，橙，皮， 苷，在2