HPL和TL法对蓝色签字笔墨水分类鉴定研究.doc

HPLC和TLC法对蓝色签字笔墨水分类鉴定研究 ［ ］结合薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法 (HPLC),分析市售32种不同厂家、不同品牌以及同一品牌 不同规格的蓝色签字笔油墨成分。首先采用正丁醇：无水乙 醇：水：冰醋酸=6: 2: 2: 1 (体积比)为展开剂，用TLC 法对32支不同产地不同牌号蓝色签字笔字痕分析，再以甲 醇-NH4HC03缓冲盐体系为流动相，流速0. 8mL/min进行高效 液相色谱分析。根据色谱峰个数，可将32种蓝色签字笔分 成9类。 ［关键词］高效液相色谱；薄层色谱；蓝色签字笔；分 类 分类号：0657 A 2095-5200 (2015) 04-061-04 ［Abstract］ Thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC) were employed to analyze the components contained in 32 different blue gel pen inks in this study. The components of 32 blue gel pen inks were analyzed by TLC with developing solvent containing n-butanol : ethanol： water： glacial acetic acid二6: 2： 2： 1. A better separation was archived using HPLC with mobile phases containing ammonium acid carbonate. The two methods are complementary to each other. This analysis of blue gel pen inks was found to be effective and credible. ［Key words］ High performance liquid chromatography； Thin layer chromatography； Blue gel pen inks； Classification 前言 签字笔由于具有书写流畅、色彩鲜艳及价廉、环保等特 点，逐渐成为人们最常用的笔种之一。在各类刑事、经济案 件及民事纠纷中，经常涉及到有关蓝色签字笔字迹检验和鉴 定。签字笔墨水主要由溶剂、染料、增稠剂、稳定剂和添加 剂等组成。不同厂家或同厂家不同牌号签字笔中成分有所不 同，特别是其中的染料组成会有一些差异，这就为签字笔种 类鉴别提供依据。目前有关墨水分析的光谱法有红外光谱法 ［1-2］、拉曼光谱法［3］;色谱法有薄层色谱法［4-5］，高效 液相色谱法［6-7］、毛细管电泳［8-9］等；还有用质谱法鉴定 墨水中染料的研究［10］。在这些分析方法中，光谱法特别是 红外和拉曼光谱法是无损分析，在墨水分类鉴定中发挥很大 作用，但是由于墨水成分复杂，这些方法识别率相对较低 ［11-13］。与无损方法相比，有损和半有损的色谱方法识别 率相对较高［14-16］。为此，本文首先用TLC对收集的蓝色 签字笔进行分析，根据斑点个数、颜色以及比移值将其分为 9类。在此基础上，使用HPLC以NH4HC03缓冲盐体系为流动 相，进行分离、分类。将HPLC与TLC分类结果进行比较， 为更准确地区分蓝色签字笔墨水种类提供依据。 1实验部分 1.1仪器和试剂 1. 1. 1仪器Waters 600高效液相色谱仪，Waters 2996 二极管阵列检测器，Waters 717 Plus自动进样器（Waters 公司，美国）；色谱柱为Purospher STAR C18色谱柱（Merck 公司，德国），Millipore超纯水器（Millipore公司，美国）; 微孔滤膜（0. 45 y m）o 1.1.2试剂甲醇、无水乙醇、异丙醇、正丁醇、冰醋 酸、乙酸乙酯、丁酮、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）等为分析 纯。乙腈、甲醇为色谱纯（Merck公司，德国）。 1.1.3样品由中国、美国、英国、日本、德国以及中 国台湾等地生产的32支市售蓝色签字笔。 1.2实验方法 1.2.1实验条件薄层色谱条件：实验使用德国Merck 硅胶GF254层析板。展开剂为正丁醇：无水乙醇：水：冰 醋酸=6: 2： 2： 1。 HPLC条件：采用甲醇（A）-碳酸氢铵（0. 01mol/L） （B） 为流动相进行梯度洗脱，A相起始比例为45%, 20min内上升 至67%,保持该比例至60min;柱温：25 °C;流速0. 8mL/min； 进样量：10 U