HPL系统性能的测试.doc

HPLC系统性能的测试 GLP (Good Laboratory Practice) GMP (Good Manufacturing Practice) SOPs (Standard Operating Procedures) 测试项目 梯度阶梯(Gradient step test) 梯度线性(Gradient linearity) 系统的滞后体积(System dwell volume) 自动进样的重现性(Automatic sampler reproducibility) 流量准确度(Flow rate accuracy) 压力衰减(Pressure decay) 梯度阶梯(Gradient step test) 流动相A: HPLC纯水 流动相B: 0.1%丙酮 色谱柱：由0.005 in. i.d.不锈钢或PEEK管代替，压力2 500 psi 检测器：UV 280 nm 记录器：用100% A和100% B调节，使检测器输出信号与记 录器相匹配。 梯度程序：流量2 ml/min,阶式梯度，由0-100%B，每4分钟 增加10% B。(50%增量为5%) Time 0 0 4 0 3 10 12 20 15 30 20 40 24 45 28 50 32 55 36 60 40 70 44 ao 48 90 52 100 56 100 梯度线性(Gradient linearity) 流动相A: HPLC纯水 流动相B: 0.1%丙酮 色谱柱：由0.005 in. i.d.不锈钢或PEEK管代替，压力2 500 psi 检测器：UV 280 nm 记录器：用100% A和100% B调节，使检测器输出信号与记录 器相匹配。 梯度程序:流量1 ml/min，0-100% B线性梯度15分钟，100% B 恒组分10分钟。 | Time : %8 0 Q 15 ICO 25 100 k1 / z Time {ml0) Result frcm occ^pfcjbla (a) □ rope rlioning and 4b) g^adienblin^sr t/ ?5k- Co. dilisnc ore desrioed in 4ie text. 0 W 2d Time (mini Results from unacceptable io) pro- □orticning 3rxJ {fc) g-adiert iinearity teste- 系统的滞后体积(System dwell volume) tD - t50% - 0.5 to tD：滞后时间（分） t5 0%:线性梯度记录中达到初始信号和终止信号 差值的50%所需的时间（分） tG：线性梯度时间（分） Vd = tneF VD:滞后体积（毫升） F:流量（毫升/分） 自动进样的重现性(Autosamplerreproducibility) 色谱柱：Cs或Ci8柱 色谱条件：按照色谱柱厂家的建议设置 Loop volume (pU) 1 Volume loaded fuLl Run Area 1 2 3 4 5 5 RSD, 6 injections Variable Loop Iniecticn Loop volume (yL) Voiumo loaded uQ )Run Area tR 1 2 . 3 4 5 3 RSOr 6 injections 流量准确度(Flow rate accuracy) 流动相:hplc纯水 色谱柱：由0.005 in. i.d.不锈钢或PEEK管代替，压力2 500 psi 流量：1毫升/分，冲满10毫升容量瓶所需时间：10分±2% (12 秒) 压力衰减(Pressure decay) 在储液瓶中盛有经脱气处理的纯水 在泵的出口处用螺塞堵严； 设置小流量增加泵压至3000 psi附近，停流; 记录初始压力和10分钟时的压力 10分钟内的压力降＜ 15%