IFN―γ和IL―1在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其意义.doc

IFN-V和IL一 1在鼻咽血管纤维瘤中的表达及其意义 ［ ］目的检测干扰素(interferon- Y , IFN-Y )和白细胞介素-1 (interleukin 1, IL-1)在鼻咽 血管纤维瘤中的表达水平，探讨IFN-Y和IL-1在鼻咽血管 纤维瘤骨质破坏机制中的作用。方法应用免疫组化SP法 检测IFN-Y和IL-1在2000?2012年期间20例鼻咽血管纤 维瘤和2015年3?6月期间10例正常下鼻甲组织中的表迖。 结果IFN-Y和IL-1蛋白在JNA中的阳性表迗率均为100%, 明显高于IFN-Y和IL-1蛋白在下鼻甲组织中的阳性表迗率 20% (P均0.05)。结论IFN-Y和IL-1在鼻咽血管纤维瘤 组织中阳性表达率较高，可能是参与鼻咽血管纤维瘤骨质破 坏的相关因素。 ［关键词］干扰素-Y;白细胞介素-1;鼻咽血管纤维瘤； 免疫组化 ［ ］R739. 63 ［ ］A ［ ］ 1673-9701 (2016) 18-0001-03 鼻咽血管纤维瘤(juvenile nasopharyngeal angiofibroma, JNA)为鼻咽部最常见的良性肿瘤，常发生 于10?25岁的青年男性，由大量的血管、弹性纤维及致密 结缔组织组成，Liang等［1］认为其本质是血管错构瘤。虽然 JNA是良性肿瘤，但其破坏颅底及周围骨质可导致严重的并 发症。JNA破坏颅底骨质进行扩张性生长的机制尚未清楚。 最近在研究病理性骨质破坏性疾病中发现IFN-Y和IL-1在 胆脂瘤型中耳炎骨质破坏中发挥重要作用［2-4］。JNA的骨质 破坏过程与胆脂瘤的骨质破坏过程有许多相似之处，它们都 是良性肿瘤，都会破坏颅底骨质进行扩张性生长。本实验拟 应用免疫组化染色SP法检测IFN-Y和IL-1在JNA组织中 的表迗，探讨其在JNA骨质破坏机制中的作用，现报道如下。 1材料与方法 1. 1材料来源 20例鼻咽血管纤维瘤标本来自于2000?2012年福建医 科大学附属第一医院病理科，福建省耳鼻喉研究所石蜡包埋 存档蜡块。鼻咽血管纤维瘤组：鼻咽血管纤维瘤患者标本共 20例，术后病理诊断均为鼻咽血管纤维瘤，患者年龄11? 35岁，平均18. 5岁，其中男20例，女0例。按Metin等［5］ 的肿瘤分期标准：I期7例，II期6例，III期6例，IV期1 例。对照组10例下鼻甲组织术后诊断为下鼻甲慢性炎症， 患者年龄18?40岁，平均25岁，其中男5例，女5例。标 本来自2015年3?6月温州医科大学附属第一医院耳鼻喉_ 头颈外科，在内窥镜下取鼻中隔偏曲伴下鼻甲肥大患者的下 鼻甲组织。标本均是24 h内取材，应用4%甲醛固定，常规 石蜡包埋，4 um厚连续切片。 1.2试剂 兔抗人IFN-y单克隆抗体购自SANTA CRUZ公司和兔抗 人IL-1多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司。 1.3免疫组织化学染色 操作严格按照说明书进行，步骤如下：①烤片，68°C, 20 min；②常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水；二甲苯I 20 min- 二甲苯 1120 min-100%酒精 I 10 min-100%酒精II10 min-95% 酒精5 min-80%酒精5 min-70%酒精5 min；③阻断灭活内 源性过氧化物酶：3%H2O2 37°C孵育10 min, PBS冲洗3X5 min；④抗原修复：置0. 01M枸橼酸缓冲液（pH 6.0）中煮 沸（95°C，15?20 min），自然冷却20 min以上，再用冷水 冲洗缸子，加快冷却至室温，？83冲洗3父5 111化；⑤正常羊 血清工作液封闭，37°C10 min,倾去勿洗；⑥滴加一抗4°C 冰箱孵育过夜，PBS冲洗3X5 min （用PBS缓冲液代替一抗 作阴性对照）；滴加生物素标记二抗，37°（3孵育30111什，？83 冲洗3X5 min;⑦滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素 工作液，37°C孵育 30min，PBS 冲洗 3X5 min;⑧DAB/H202 反应染色，自来水充分冲洗后，苏木素复染，常规脱水，透 明，干燥，封片。用PBS代替第一抗体作为阴性对照，用已 知阳性片做阳性对照。 1.4免疫组化结果判断[6] IFN-Y和IL-1的阳性染色者细胞胞浆有棕黄色颗粒沉 着，阳性细胞数：0分为无阳性细胞，1分为阳性细胞数75%o 染色强度：0分为无染色，1分为弱染色，2分为中等强度染 色，3分为强染色。计算各抗体的阳性细胞数和染色强度得 分，以3?7分为阳性。 1. 5统计学分析 应用SPSS13. 0统计学软件进行分析，IFN-Y和IL-1 阳性表达率采用x2检验或者精确概率法进行比较，P Takayanagi H，Sato K, Takaoka A, et al. Interplay bet