医学全血水杨酸钠药物代谢动力学参数测定.docx

水杨酸钠药物代谢动力学参数测定 前言： 本实验通过测定不同时间点的血药浓度，作出相应的药-时曲线，用一定的数学方法对曲线加以拟合，根据相关统计学指标最终确定药物的房室模型，并计算主要药代动力学参数。 1、实验目的 掌握药物代谢动力学参数的意义及其测定方法 2、实验动物 家兔，体重2.5～3kg，性别不拘。 3、实验药品 10%水杨酸钠、0.06%水杨酸钠标准液、10%三氯醋酸、10%三氯化铁、0.5%肝素、生理盐水、盐酸利多卡因注射液、蒸馏水。 4、实验器材 电子天平、兔手术台、试管架、10ml试管、10ml离心管、5ml和1ml加样枪及枪头、5ml注射器、6号针头、722分光光度计、离心机、涡旋混匀器、手术器械、动脉插管、棉球、烧杯、头皮针。 5、实验方法 1. 取10支10ml试管，用0.5%肝素润湿管壁。 2. 家兔称重，固定于手术台，剪去颈部前被毛。在盐酸利多卡因局部麻醉下作一侧颈动脉插管，取血3ml，摇匀试管内血液，防止凝血，血管钳夹闭导管，生理盐水纱布覆盖手术部位。 3. 沿对侧耳缘静脉缓慢注射10%水杨酸钠150mg/kg，于注射后1、3、5、10、20、50、80、110min分别动脉放血1.5ml入相应的试管并摇匀。 4. 取10支10ml离心管，分别标为“对照”、“标准”及相应“取血时间”，按下表加入样品及试剂。 试管号 10%三氯醋酸（ml） 全血 （ml） 0.06%水杨酸钠（ml） 蒸馏水 （ml） 对照 4 1 0 1 标准 4 1 1 0 各取血时间 4 1 0 1 5. 各管用涡旋混匀器充分混匀，2000rpm，离心10min。 6. 各管取上清液3ml加入另一套干净试管中，在各加入10%三氯化铁0.3ml，混匀显色。以对照管调零，在722分光光度计上读取520nm的OD值。 7. 求出水杨酸钠在家兔体内各时间点的血药浓度（Y）。 先求出标准管浓度（Y0）与OD值（X0）的比值（K），K=Y0/X0 ，Y=XK。 8. 绘出时-药曲线，以水杨酸钠浓度的对数值作为纵坐标，对应时间为横坐标作图，分析水杨酸钠动力学模型及药动学参数计算。 6、实验结果 各时间点取出血样离心后的上清液加三氯化铁显色后,用分光光度计所测出其0D值。由标准组0D值X0和标准组血药浓度Y0，求出K= 0.7634。用此比值，可得到各组血药浓度（表1）。 时间（h） OD值 浓度（mg/L） 0.016667 0.105 80.157 0.05 0.117 89.3178 0.083333 0.082 62.5988 0.166667 0.076 58.0184 0.333333 0.072 54.9648 0.833333 0.075 57.255 1.333333 0.022 16.7948 1.833333 0.003 2.2902 表1. 各时间点血药浓度 水杨酸钠C-T曲线 图中上升支为最初几分钟药物在体内的吸收分布相，持续较长时间的下降支为药物的代谢排泄相。 以T为横坐标、lnC为纵坐标,作lnC-T曲线 Ln-T散点图 初步观察可知，散点图形在10min处出现转折，血药浓度呈现先快后慢的衰减曲线，可初估为二室模型，试拟合双指数方程 Ct=Ae-αt+Be 实验数据处理采用“残差法”来计算双指数方程有关系数以及药物动力学参数，直线拟合采用最小二乘法，具体步骤由计算机软件Excel2007完成。拟合的结果为： A=20.905，B=97.319， α=33.082，β=4.141。拟合药-时方程为 C 利用以上参数，代入以下计算公式可进一步求出水杨酸钠各药代动力学参数。 C0=A+B, V1=D0/ C0 t1/2(α)=0.693/α, t1/2(β K21=(Aβ+Bα)/(A+B), Ke=αβ/K21 , K12=α+β-K21-Ke AUC=A/α + B/β, Vd=D0/β?AUC, V2=Vd-V1 其中，Vd表示表观分布容积，V1表示中央室表观分布容积，V2表示外周室表观分布容积, t1/2(α)为药物分布半衰期，t1/2( 参数 单位 数值 参数 单位 数值 A mg/L 20.905 Ke 1/h 4.825 α 1/h 33.082 K12 1/h 2.280 B mg/L 97.319 Vd L/Kg 2.957 β 1/h 4.141 V1 L/