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医学药物对离体心脏活动的影响
实验三 药物对离体心脏活动的影响
[实验目的]
学习斯氏离体蛙心灌注法,观察强心苷对离体蛙心收缩强度、频率和节律的影响。
[实验材料]
蛙或蟾蜍、蛙板、蛙心夹、手术器械、探针、斯氏蛙心套管、张力换能器、电脑、双凹夹、长柄木夹、任氏液、低钙任氏液、0.2%去乙酰毛花苷丙(西地兰)等。
[实验方法]
1、取蛙或蟾蜍一只,左手握蛙,用食指下压头端,拇指按压背部,使头前俯。用探针破坏脑及脊髓,背位固定于蛙板上,剪开胸部皮肤、肌肉及胸骨,打开胸腔,剪破心包膜,暴露心脏。
2、在主动脉分支处下穿一根线,以备结扎套管用。在左主动脉上剪一V型切口,插入盛有任氏液的蛙心套管,见到套管内的液面随心搏上下波动后,将线扎紧并固定在套管的小钩上。
在插管过程中要及时用滴管吸去套管内血液,以免血块堵塞。
3、结扎右主动脉,剪断两根动脉,持套管提起心脏,用线自静脉窦以下把其余血管一起结扎(勿伤及或结扎静脉窦),分离周围组织,在结扎处下剪断血管使心脏离体。
4、用任氏液连续换洗,直至无血色,使套管内保留1.5ml左右的任氏液。将蛙心套管固定在铁支架上,用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖,将长线与张力换能器连接。
5、打开电脑,点击桌面中的BL-410图标,由输入信号,选择做张力的有关内容和相关标记内容。
[实验结果及讨论]:
该曲线为正常情况下离体蛙心脏的收缩曲线。
该曲线为低钙任氏液环境下的离体蛙心脏的收缩曲线。
分析:低钙任氏液为蛙心提供了一个低钙的环境,由于钙离子的减少,不能够通过钠离子钙离子交换机制使钙离子内流,进而不能使细胞内的钙离子增多,不能激活钙离子通道,使钙离子进入心肌细胞内达到以钙释钙的作用,不能够增加心肌的收缩力和减慢心率,所以在低钙任氏液的作用下,与任氏液灌注的蛙心收缩相比心率会增加而心肌收缩力会减弱。
该曲线为加入西地兰后的收缩曲线。(由于实验失误加入过量强心苷使蛙心脏中毒几近死亡)
分析:强心苷具有正性肌力和负性频率的药理作用。心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶是强心苷的受体,治疗量强心苷与之结合会使酶的活性下降,从而抑制Na+-K+交换,导致细胞内钠离子增多,钾离子减少,进而通过钠钾交换机制及肌浆网钙离子通道使心肌内钙离子增多,心肌收缩力增强,负性频率是正性肌力的继发结果,所以在治疗量强心苷的强心苷的作用下,会是心肌收缩力增大心率减慢。正在本次实验中由于人为因素操作失误加入了1.5ml西地兰使心脏中毒,心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶活性受到明显抑制,心肌细胞内钙离子超载,钠离子外流及钾离子内流明显减低,细胞低钾导致膜电位减小自律性增加,引起了心律失常。但由于在实验中又一次操作失误将心脏捅破,是心脏漏液间接稀释了强心苷,所以过量的强心苷并未对实验结果产生较大影响仍然使心肌收缩力增大而心率减小,出现了正常的实验结果,本次实验过程一波三折然而实验结果还算顺利,实验成功。
思考题:
强心苷的药理作用为正性肌力和负性频率,即治疗量的强心苷会使心脏心肌收缩力增强而会使心率减慢。
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