希森美康标准操作规程Sysme 1000i-SOP(word无乱序).doc

.. 1. 分析参数和方法学名称 Sysmex XS 提供 24 项参数的结果，各检测参数和方法见表 1。 表 1. Sysmex XS 各检测参数和方法 参数 首字母缩写 检测方法 白细胞 WBC 流式细胞计数 红细胞 RBC 鞘流 DC 检测方法 血红蛋白 HGB SLS 血红蛋白检测法 红细胞比积 HCT RBC 累积脉冲高度检测法 平均红细胞体积 MCV 由 RBC 和 HCT 算出 平均红细胞血红蛋白量 MCH 由 RBC 和 HGB 算出 平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC 由 HCT 和 HGB 算出 血小板 PLT 鞘流 DC 检测方法 中性粒细胞百分比 NEUT% 流式细胞计数 淋巴细胞百分比 LYMPH% 单核细胞百分比 MONO% 嗜酸性粒细胞百分比 EO% 嗜碱性粒细胞百分比 BASO% 中性粒细胞数 NEUT# 淋巴细胞数 LYMPH# 单核细胞数 MONO# 嗜酸性粒细胞数 EO# 嗜碱性粒细胞数 BASO# 红细胞分布宽度－标准差 RDW-SD 根据红细胞直方图算出 红细胞分布宽度－变异系数 RDW-CV 根据红细胞直方图算出 血小板分布宽度 PDW 根据血小板直方图算出 平均血小板体积 MPV 根据血小板直方图和PLT算出 大血小板比率 P-LCR 根据血小板直方图算出 血小板压积 PCT 根据血小板直方图算出 2. 原理 2.1. 鞘流 DC 检测方法（RBC、PLT、HCT） 在该检测器内，样品喷嘴定位在孔的前面且与中心对齐。将稀释后的样品由样品喷嘴推入锥 形室以后，由前鞘流内的试剂包裹通过小孔的中心。 通过小孔以后，经过稀释的样品由后鞘流中的试剂包裹送入捕集管中。这样就可以防止该区域的血细胞回流，并防止产生假性血小板脉冲。鞘流方法改善了血液计数的准确性和重现性。同时由于血细胞通过在一条直线上的小孔，所以也可防止产生异常血细胞脉冲。 2.2. 使用半导体激光器的流式细胞计数方法 使用流式细胞计数法检测细胞和其它生物粒子的物理和化学性质。使用流式细胞计数法只需 很少的样品就可对这些细胞和粒子进行检测。 一个血液样品经过吸液和定量、稀释至指定的稀释比，并进行染色。然后将该样品送入流动 池中。 这种鞘流装置改进了细胞计数的准确性和重现性。同时，由于血细胞颗粒成行通过该流动池 的中心，故而防止产生异常血液脉冲并可减少流动池的污染。 一个半导体激光束通过该流动池照射到血细胞上。前向散射光由光电二极管接收，侧向散射 光和侧向荧光则由光电倍增管接收。光信号被转化为电脉冲，从而可以得到有关血液细胞的信息。 2.2.1. 前向散射光和侧向散射光 当一束激光照射到血细胞颗粒上时，就产生光散射。XS 检测前向散射 光和侧向散射光，前向散射光的强度反映血液细胞体积大小。侧向散射光的强度反映细胞内 部（如细胞核的体积大小）的信息。 2.2.2. 侧向荧光 当光照射到经过荧光染色的血液细胞上时，就产生比入射光波长更长的光。随着染色集团浓 度的增加，荧光强度也增加。通过测量荧光强度，可以得到有关血细胞染色的信息，XS 检测 侧向荧光。 2.3. SLS-血红蛋白测定法 在稀释的血液中加入溶血素，红细胞中的血红蛋白被释放出来。血红蛋白在月桂洗硫酸钠的 作用下，二价铁转变成三价铁，并与月桂洗硫酸钠结合形成 SLS-Hb，SLS-Hb 进入血红蛋白 检测系统。测定 SLS-Hb 在 555nm 波长下的吸光度值，并通过与加入样品前稀释液的吸光度 进行对比进行计算。 2.4. 计算（红细胞指数） 红细胞指数（MCV、MCH 和 MCHC）通过 RBC 计数（RBC）、Hb 浓度（HGB）和红细胞 压积（HCT）的值计算出。计算公式如下： MCV（fl）＝ HCT×1015 RBC/L MCH (pg)＝ HGB(g/L)×1012 RBC/L MCHC(g/L)＝ HGB(g/L) HCT 3. 标本准备 用真空采血管（紫色盖头）采集 EDTA-K2 抗凝的静脉血。采血后立即与抗凝剂混匀，在试管 外壁贴上单据号等病人信息或检验联号后，放置室温立即送检。 穿刺时须防止穿刺针刺扎采血员，以避免血液中传染性病原如肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒 等以及血液中未知的可致病成分污染采血员。 标本在室温下最多保留 4 小时。不能在 4 小时内检测的标本，放置于冷藏冰箱（2℃~8℃） 中保存，8 小时内有效，使用前从冰箱中取出回复室温后检测。 4. 试验器材 乳胶手套、试管架 5. 仪器 Sysmex XS 全自动血液分析仪 6. 试剂 6.1. 稀释液（CELLPACK） 6.1.1. 试剂品牌：Sysmex 代码：PK-30L 包装规格：20L 6.1.2. 试剂成份： 氯化钠 6.38