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酵母菌培养观察
酵母菌的培养和观察
目的 认识酵母菌的形态特征,了解培养酵母菌的方法。
实验前的思考 人类认识和利用酵母菌的历史悠久,早在史前时期,先人们就学会酿酒。约在6000年前,就发明发面的方法。直到十九世纪有了显微镜,人们才窥探到醉母菌的真面目。对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯,他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入研究酵母菌的。
材料器具 甜酒酿汁液,新鲜酵母,豆芽;显微镜,载玻片,盖玻皮,玻璃棒,镊子,滴管,吸水纸,酒精灯,石棉网,火柴,漏斗架,玻璃斗,量杯,三角烧瓶,烧杯,天平,量筒,棉絮;蔗糖,乳酸,碘液。
步骤
1.观察酵母菌
(1)用滴管从甜酒酿的汁液中吸取一滴汁液,滴在载玻片上,用针摊开,盖上盖玻片,在低倍镜下就能清楚地看到甜酒酿的汁液中悬浮着无数酵母菌。再换高倍镜仔细观察一个酵母菌,可以看到酵母菌是椭圆形的单个细胞,细胞中有许多小颗粒,也有几个大的液泡(图示)。有的酵母菌的一端长出大小不同的突起,这是酵母菌的芽体。芽体成长脱落,就成为新的个体,有的芽体在从母体脱落前又长出突起。这种繁殖方法叫出芽繁殖。
(2)在盖玻片一边加一滴碘液,从另一边用吸水纸把染液引入盖玻片下。不久就能看到被染成棕褐色的细胞核和变成蓝紫色的淀粉粒。
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2.培养酵母菌
(1)用蔗糖液培养 在盛有100毫升的三角烧瓶里加5克蔗糖,煮沸。等到溶液稍稍冷却,加一小块鲜酵母,用玻璃棒搅拌均匀;再用棉絮塞紧瓶口。然后把烧瓶放在 25~30℃
(2)二三天后吸取溶液在显微镜下观察,就可看到已培养出大量酵母菌。
注意事项
1.观察酵母菌时,视野里杂质较多,有淀粉粒、半分解的淀粉团块、曲霉孢子和其它杂菌等等,只要掌握住酵母菌的形状和体内具有液泡,尤其是染色后体内具有褐色的核和蓝色的淀粉粒这些特点,就可以跟其它杂菌区分开来。
2.发酵在缺氧的环境里仍能良好地进行,不必为了增加氧气去搅拌已放入菌种的培养液。
分析和讨论
酵母菌是少数能在缺氧环境里生存较长时间的一种微生物,它属于兼性菌类。在一般情况下进行有氧呼吸。如环境中有丰富的糖类,它进行缺氧呼吸。其过程如下:
1.C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O+2.87×103兆焦(有氧呼吸)
2.C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+109×103兆焦(缺氧呼吸)
建议 培养酵母菌还可以采用下列两种方法。
1.用乳酸、豆芽汁和蔗糖液培养
(1)取10克豆芽放入100毫升水中,加热煮沸半小时,盛起,用细布过滤。在滤液里加5克蔗糖和
(2)把鲜酵母半块或老面(发酵后晾干的面粉团)打碎,投入培养液中,放在黑暗温暖的地方,二三天后就可以培养出大量酵母菌。
2.用巴斯德培养液培养
酵母菌需要的无机营养来自外界环境。如果在培养液内适当增加氮、磷等元素,效果会更好。巴斯德培养液的配方如下:
蔗糖15克,碳酸铵1克,磷酸氢钾0.2克,磷酸钙0.02克,硫酸镁0.
于运联 中学生物学实验大全 1994年12月
酵母菌的培养与转形作用
Ⅰ.目的
酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)是一种很有用的真核生物,他拥有生物的特性,可用原核生物的方式培养,其基因组较小,复制时间短,可作为基因分析,在分子生物学研究上的突破,很多都是以它为材料。在工业上酵母菌也很重要,例如:啤酒、面包、酒、重组胜和蛋白质之合成皆与酵母菌有关。
在重组DNA技术中,酵母菌(yeast)乃是一种很重要的寄主生物,可用质体DNA为媒介物引入外来DNA并表现之。转型技术与大肠杆菌相似,但其方法需修饰以瓦解其细胞壁,常用的两种方式进行酵母菌的转型作用,一是使酵母菌形成Spheroplast,此法较麻烦需将细胞壁去掉,另一种是用碱性阴离子(例如:LiCl或RbCl)加上热休克快速地处理完整的细胞,本实验用后者来实行,收集对数生长期的酵母菌细胞,经碱性阴离子及热休克处理,可使细胞外鞘发生变化,有利于吸收质体DNA,正如大肠杆菌一样(参照实验5),不同的因子会影响效率,质体DNA吸收能力与质体的大小、DNA的构形、寄主品系、筛选步骤有关,与大肠杆菌的转形作用相比有显着的差别是转形效率,酵母菌的转型效率在每1 mg质体DNA中,约可获取103-104转形细胞。
II.酵母菌的培养
1.仪器用具:
a. 30 ℃
b. 酒精灯
c. 接种环
2.药品与试剂:
a. yeast 菌株:
EGY48〔MAT a, ura3, his3, trp1, LexAop(x6)-LEU2〕
YM4271〔MATaura3-52, his3-200, lys2-801, ade2-101, ade5, trp1-901, Leu2-3,112, try1-501, gal 80Dgal 4D
Y187〔
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