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2.日本的一个研究小组将Aequorea victoria水母中编码绿色荧光蛋白(GFP)的基因导入长尾猕猴的卵母细胞中,最终获得在紫外线照射下能发绿光的“绿光猴”。请回答下列相关问题: (1)从水母中获取GFP基因后,可利用_____技术获得大量该基因,该过程所利用的酶必须具有_______的特点。 解析答案 解析 从水母中获取GFP基因后,可利用PCR扩增技术获得大量该基因,由于PCR技术需要高温解链,因此该过程所利用的DNA聚合酶必须具有耐高温的特点。 PCR 耐高温 (2)导入目的基因的卵母细胞需培养至____________________________,才能与获能的精子受精。精子和卵细胞间的信息交流是通过___________方式实现的。 解析答案 解析 导入目的基因的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期(MⅡ中期),才能与获能的精子受精。由于细胞膜上存在特异性受体,精子和卵细胞间的信息交流可以通过细胞膜接触方式实现。 减数第二次分裂中期(MⅡ中期) 细胞膜接触 (3)受精卵培养至_____________时期可进行胚胎移植,移植的胚胎在受体内存活的生理学基础是_______________________________________ _________。 解析答案 解析 受精卵培养至桑椹胚或囊胚时期可进行胚胎移植,移植的胚胎在受体内存活的生理学基础是受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应。 桑椹胚或囊胚 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫 排斥反应 (4)GFP基因能在猕猴细胞中表达,是因为不同生物共用_____________ __,若“绿光猴”只是部分细胞合成了绿色荧光蛋白,这是_________ _______的结果。 解析答案 解析 GFP基因能在猕猴细胞中表达是因为不同生物共用一套遗传密码子,若“绿光猴”只是部分细胞合成了绿色荧光蛋白,这是基因选择性表达的结果。 一套遗传密码 子 基因选择 性表达 3.Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图(图中数字序号表示的是相关过程)。请回答下列有关问题: 解析答案 (1)过程②利用的技术是_____________,过程③中涉及到了基因工程技术,其中作为受体细胞的是_______。 解析 过程②利用的技术是早期胚胎培养,过程③中涉及到了基因工程技术,其中作为受体细胞的是ES细胞。 早期胚胎培养 ES细胞 解析 图示利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,可推知过程③中获取的目的基因是(正常的)Rag2基因。步骤③中,在构建含有Rag2基因的表达载体时,可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。分离、培养ES细胞过程中需要用胰蛋白酶分散细胞。PCR技术扩增过程中用耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)。基因导入过程中需要用限制性核酸内切酶、DNA连接酶。 (2)过程③中获取的目的基因是________________,可以根据该基因的______________________________________设计引物,利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和_____________ _______________________等。 解析答案 (正常的)Rag2基因 脱氧核苷酸序列(或碱基对序列或遗传信息) 胰蛋白酶、耐 高温的DNA聚合酶(Taq酶) (3)图中造血干细胞中的遗传物质至少有____个来源。为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的_______,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。图中所述克隆技术属于____性克隆。 解析答案 解析 图中造血干细胞中的遗传物质至少有3个来源:上皮细胞、卵母细胞和Rag2基因。为检测Rag2基因的表达情况,可采用抗原—抗体杂交法,即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质(抗原),用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。根据图形分析可知,基因导入是在体外进行的,因此,该治疗方式属于体外基因治疗。图中所述克隆技术也属于治疗性克隆。 三 蛋白质 治疗 4.美国加州的科学家成功克隆出了人体胚胎,进而开发出有研究价值的干细胞,基本步骤如下图所示。请据图回答下列问题: (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的________或胎儿的原始性腺中分离得到的一类细胞。上图所示的动物细胞工程中应用到的技术主要有____________、_______________。 解析答案 解析 胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的内细胞团或胎儿的原始性腺中分离得到的一类细胞。上图所示

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