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血液单细胞样品的制备 淋巴细胞的制备 protocol: 上层为血浆层，中层为分离液层 (淋巴细胞所处的位置在血浆层 与分离液层中间)，底层为红细 胞，红细胞上为粒细胞 血液单细胞样品的制备 淋巴细胞的制备 protocol: 稀释全血 分离液 离心前 离心后 血浆 淋巴细胞 粒细胞 红细胞 用吸管将上层与中层之间的淋 巴细胞吸出，收集到另一支离心管，用NS稀释至10ml，离心洗涤2次，每次均以1500rpm, 10min，弃上清后即得到纯度较高的淋巴细胞，但可有少量的单核细胞。 血液单细胞样品的制备 淋巴细胞的制备 protocol: 血液单细胞样品的制备 淋巴细胞的制备 protocol: 5 70%冰乙醇固定，置4℃冰箱保存 血液单细胞样品的制备 淋巴细胞的制备 protocol: 血液单细胞样品的制备 Categorization: 1 淋巴细胞的制备 2 粒细胞的制备 3 单核细胞制备 4 骨髓细胞中白血病细胞的制备 5 网织红细胞的制备 血液单细胞样品的制备 粒细胞的制备 protocol: 1 用淋巴细胞分离液对细胞进 行分层 2 粒细胞的比重较淋巴细胞稍 大，因此经分离液分离后的 粒细胞，分层于红细胞之上， 分离液的底部 血液单细胞样品的制备 粒细胞的制备 protocol: 3 以吸管慢慢将粒细胞层吸出， 置另一只离心管内，以5ml的 Hank′s液洗涤三次，每次离 心沉淀1500rpm，10min 血液单细胞样品的制备 粒细胞的制备 protocol: 4 在吸取粒细胞的同时常附带一 些红细胞，因此需将红细胞去 除，加入1.0ml低渗溶液，30- 40s 5 再以Hank′s液洗涤2次，即 可获得纯度大于95%以上的粒 细胞 血液单细胞样品的制备 Categorization: 1 淋巴细胞的制备 2 粒细胞的制备 3 单核细胞制备 4 骨髓细胞中白血病细胞的制备 5 网织红细胞的制备 血液单细胞样品的制备 单核细胞的制备 protocol: 1 取肝素1000u/ml抗凝全血 3.0m1,加入3.0ml NS 将血稀 释,均在无菌条件下操作 2 RPMI-1640培养液10.0ml,放入 培养瓶内,将稀释血加入培养 液中,混匀,与培养瓶接触面要大 血液单细胞样品的制备 单核细胞的制备 protocol: 3 放入37℃恒温箱内孵育30-40min, 取出培养瓶 ,将血倾倒掉,用NS培 养瓶轻轻冲洗一次,以去掉残留的 血液,这时培养瓶壁上贴附了大量 的单核细胞,因为单核细胞具有短 时培养期内贴附快的特点 血液单细胞样品的制备 单核细胞的制备