扁蓿豆AFLP体系的建立及在其遗传完整性检测中的应用-草业科学专业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 缩 略 语 表 AFLP(Amplified fragment length polymorphism) 扩增片段长度多态性 DNA（Deoxyribose nucleic acid） 脱氧核糖核酸 CTAB（Cetyl triethylammonium） 十六烷基三甲基溴化胺 PVP(Polyvinyl Pyrrolidone) 聚乙烯吡咯烷酮 Rnase(Ribonuclease) RNA 酶 TE(Tris-EDTA) Tris-EDTA 缓冲液 PCR（Polymerase chain reaction） 聚合酶链式反应 EDTA（Didodium ethylenediaminetetra-acetate） 乙二胺四乙酸 TEMED（Tetramethylethylenediamine） 四甲基乙二胺 PA（Polyamide） 聚酰胺 CK（Control check） 对照 IPGRI（International Plant Genetic Resources Institute） 国际植物遗传资源研究所 内蒙古农业大 内蒙古农业大学硕士学位论文 PAGE 11 PAGE 10扁蓿豆 PAGE 10 扁蓿豆 AFLP 体系的建立及在其遗传完整性检测中的应用 1 前言 1.1 文献综述 1.1.1 分子标记概述 为了便于从特殊表现型的表达来认识基因型，把用于遗传分析的受遗传控制的 表现型差异、染色体结构的差异以及DNA片段的差异称为遗传标记[1]。它具有2个 基本特征，即可遗传性和可识别性。因此，生物中任何有差异表型的基因突变均可 作为遗传标记。遗传标记在遗传学的建立和发展过程中具有举足轻重的作用，同时 也是遗传育种的重要工具。随着遗传学的不断发展，遗传标记的数量和种类也不断 增加。目前，应用较为广泛的遗传标记主要有4种类型，即形态标记（Morphological maker）、细胞学标记（Cytological maker）、生化标记（Biochemical maker）和分子 标记（Molecular maker）[2]。在植物学中使用的也是这四种遗传标记。 形态标记是反映植物的外部形态特征，主要包括肉眼可见的外部特征，如紫鞘、 卷叶、矮秆等,也包括生理特性、生殖特性、抗病虫性等一些内部特性。形态标记 具有易于识别和观察、简单直观等优点，但也有标记数量有限，多态性较差，表型 易受 到环境影响等缺点。细胞学标记是反映植物细胞染色体的变异，包括染色体 组型（染色体数目、每条染色体大小和形态、随体有无、着丝点的位置等）和带型 （C带、N带、G带等）的变化。与形态标记相比，细胞学标记的优点是能进行一些 重要基因的染色体或染色体区域定位，但需要花费较多的人力和较长的时间来培育 材料，同时还有些变异难以用细胞学方法进行检测。生化标记是反映植物的生化特 征特性，主要包括同工酶和等位酶两种标记。与形态标记和细胞学标记相比，其优 点一是表现近中性且对植物性状一般没有大的不良影响，二是直接反应了基因产物 差异且受环境因素影响很小。但目前可使用的生化标记数量较少，且有些酶的染色 方法和电泳分离技术有一定难度，为此其实际应用受到一定限制。分子标记是反映 生物大分子的多态性遗传变化。广义的分子标记是指可遗传的且可检测的DNA序列 或蛋白质。狭义的分子标记仅指DNA分子标记（DNA molecular marker）。目前DNA 分子标记定义的界定已经被广泛采纳，本文中的分子标记亦指DNA分子标记。 DNA 分子标记的特点 DNA分子标记是继形态标记、细胞学标记和生化标记之后发展起来的一种较为 理想的遗传标记，它能反映生物个体或种群间基因组中某种具有差异性的DNA片 段。此DNA片段是将基因组DNA经过限制性内切酶切割和分子杂交或PCR扩增后在 凝胶（或杂交膜）上检测到的[3]。与前3种遗传标记相比，DNA分子标记具有诸多 优点：①不受季节、环境限制，不存在表达与否等问题，在生物体的各个组织、各 个发育阶段均可检测到；②标记数量多，遍布整个基因组，可检测的基因座几乎是 无限的；③多态性高，自然界存在许多等位变异；④许多标记表现为共显性，能鉴 别纯合体和杂合体，提供完整的信息；⑤对生物体的影响为“中性”，不影响目标 性状的表达，和不良性状无必然连锁；⑥提取的DNA材料，在适宜条件下可以长期 保存，此对进行追溯性或仲裁性鉴定十分有利[4]。 因此，DNA分子标记可以弥补和克服在形态学标记及同工酶、蛋白质电泳中存 在的许多缺陷和难题，在作物遗传育种、基因组作图、基因定位、植物亲缘关系鉴 别、基因库构建、基因克隆等方面展现了广阔的应用前景[5]。 1.1.1.2 常用的分子标记类型 1．基于 S