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法安明对MPTP帕金森小鼠多巴胺能神经元的保护作用及机制-病理学与病理生理学专业论文
法安明对 MPTP 帕金森小鼠多巴胺能神经元的
保护作用及机制 研 究 生:方 亮 研究生导师:胡景鑫 教授
专 业:病理学与病理生理学
中文摘要
目的:小胶质细胞的激活和炎症因子的异常表达是帕金森病(Parkinson’s Disease,PD) 重要而易被忽略的病理特征。抑制上述两种反应对 PD 的治疗有 着重要的意义。法安明 (Fragmin) 为一种低分子肝素 (Low molecular weight heparin,LMWH),是临床常用的抗凝血药物。研究发现 LMWH 除了抗凝作用 外还有强大的抗炎作用且与发挥抗凝作用的官能团不同。本实验通过研究 1-甲 基-4-苯基-1, 2, 3, 6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP) 所致帕金森病小鼠模型中脑黑质区的小胶质细胞的激活情况及肿瘤坏死因子-α
(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的表达,以及使用法安明后小胶质细胞 形态的比较和 TNF-α表达的变化,探讨法安明减少 DA 能神经元的损伤是否与 抑制小胶质细胞活化和 TNF-α上调有关,为临床治疗帕金森病提供新实验依据。
方法:1、25只 C57BL/6 小鼠随机分成 MPTP 组 10 只(1 组),LMWH+MPTP 组(2 组)10 只,正常对照组 5 只(3 组),2、建立 PD 动物模型及治疗方法: 1 组腹部皮下注射生理盐水 8d 共 16 次,2d 后开始皮下注射 MPTP30 mg/kg, 连续 6d,LMWH+MPTP 组在注射 MPTP 前 2d 开始腹部皮下注射法安明 200IU/kg·12h,连续 8d。对照组以同样的方式在相应时间点注射相应剂量的生 理盐水。3、症状观察及行为学测试:观察注射 MPTP 后各组小鼠出现震颤的情 况。以爬竿试验,游泳试验及悬挂试验评价末次注射 MPTP 后各组小鼠行为学 变化 4、小胶质细胞镀银染色法显示各组小鼠小胶质细胞形态变化,观察其活 化的情况。5、免疫组化观察各组小鼠酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase ,TH)
阳性细胞数和 TNF-α阳性细胞数量变化。6、统计数据均以均数±标准差()
表示,3组间予单因素方差分析,SNK 法两两检验,以 P0.05为差异显著性标 准。
结果:1、LMWH+MPTP 组及对照组小鼠行为无明显改变,MPTP 组小鼠 动作迟缓,对外界刺激反应降低。2、爬竿试验 MPTP 组小鼠较 LMWH+MPTP、 对照组时间明显延长(P0.05),悬挂试验及游泳试验评分明显下降(P0.05) 3、镀银染色显示 MPTP 组小鼠活化的小胶质细胞较 LMWH+MPTP 组及对照组 明显增加(P0.05)。4、TH 免疫组化结果显示 MPTP 组 TH 阳性细胞较 LMWH+MPTP 组及对照组小鼠明显减少(P0.05)。5、TNF-α免疫组化显示 MPTP 组小鼠的黑质区 TNF?α阳性细胞较 LMWH+MPTP、对照组明显增加
(P0.05)。
结论:1、利用注射 MPTP 的方法建立了帕金森病小鼠模型。2、法安明能 明显减轻 MPTP 小鼠震颤等 PD 症状及改善其行为学表现。3、法安明可以减少 黑质 DA 能神经元的损伤且与抑制小胶质细胞活化有关。4、法安明可以减少 DA 能神经元的损伤且与调控 TNF?α的表达有关。
关键词:低分子肝素; TNF-α; C57BL 小鼠; MPTP
Protective Effect for dopaminergic neurons of Fragmin in MPTP-treated mice and its mechanisms
Postgraduate: FangLiang Tut or: Professor Hu Jingxin
Major:Pathology and Pathophysiology
Abstract
Objective: The abnormal activation of microglia and abnormal expression of inflammatory factors are easily-ignored but important pathologic characters of Parkinson’s disease (PD).Measures that try to control the activation of microglia and abnormal expression of inflammatory factors are improtant to attenuat
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