《糖生物化学》课件.ppt

透明质酸 硫酸角质素 硫酸软骨素 Proteoglycan aggregate of the extracellular matrix. One very long molecule of hyaluronate is associated noncovalently with about 100 molecules of the core protein aggrecan. Each aggrecan molecule contains many covalently bound chondroitin sulfate and keratan sulfate chains. Link proteins situated at the junction between each core protein and the hyaluronate backbone mediate the core protein–hyaluronate interaction. 胞外蛋白聚糖的聚集体每克能吸水50毫升，在软骨中的含量约为10%，形成的膨压对维持软骨形态有重要意义。 多功能蛋白聚糖 丝甘聚糖 丝心蛋白聚糖 多倍体聚糖 小鼠软骨蛋白聚糖 纤连蛋白 硫酸软骨素蛋白聚糖 基质中结合于硫酸肝素的生长因子 纤连蛋白的整合蛋白受体 生长因子受体 膜硫酸肝素蛋白聚糖 核心蛋白 连接蛋白 透明质酸 核心蛋白 连接蛋白 透明质酸 羧基 蛋白聚糖 氧连接寡糖链 氮连接寡糖链 硫酸基 硫酸软骨素 硫酸肝素 纤连蛋白 整合蛋白 Interactions between cells and the extracellular matrix. The association between cells and the proteoglycan of the extracellular matrix is mediated by a membrane protein (integrin) and by an extracellular protein (fibronectin in this example) with binding sites for both integrin and the proteoglycan. Note the close association of collagen fibers with the fibronectin and proteoglycan. （一)糖链结构分析的一般步骤 1.用分离蛋白质的方法纯化糖蛋白； 2.用酶法或化学法断裂糖苷键，释放聚糖； 3.用层析法分离聚糖，常用配有脉冲电流检测器的高效阴离子交换色谱(high performance anion exchange chromatography-pulsed amperometric detector, HPAEC-PAD)或亲和色谱分离寡糖； 4.用超离心、电泳、高效凝胶渗透层析等方法鉴定聚糖纯度； 5.用蒸汽压法、渗透压法、端基法、质谱法等方法测定相对分子质量； 6.用酸或无水甲醇分解聚糖，用色谱法鉴定单糖种类； 7.用多种方法部分分解聚糖，分别用质谱法等方法测序，推断拼接出聚糖序列。 十一、糖链的结构分析 (二)用于糖链结构测定的一些方法 1.用高碘酸氧化和Smith降解，不同的糖苷键位置产生不同的降解产物，降解产物可用气液色谱或薄层色谱鉴定； 2.将糖链的自由羟基甲基化，再水解，还原，乙酰化，得到的混合物用薄层色谱或气谱-质谱联用进行定性定量分析，确定糖基的连接位置； 3.综合使用外切糖苷酶和内切糖苷酶推断寡糖序列； 4.用红外光谱、拉曼光谱或质谱法(快速原子轰击质谱，FAB-MS)分析糖链结构。 基本要求 1.在有机化学的基础上，掌握单糖的结构特点，和重要的代表物； 2.熟悉重要寡糖的化学组成和用途； 3.掌握淀粉和纤维素的结构特点，比较二者在结构和功能上的差别； 4.了解重要杂多糖的功用； 5.熟悉细菌杂多糖的结构特点和研究价值； 6.掌握糖蛋白及其糖链的结构特点、功能和研究价值； 7.熟悉糖胺聚糖和蛋白聚糖的结构特点和功能； 8.熟悉糖链结构研究的基本步骤。 作业题 77页第5题； 77页第6题； 77页第7题； 77页第11题； 77页第12题； 77页第14题； 简要总结糖蛋白中寡糖链的生物学作用。 78页第20题。 习题书第13题。 * * * * * * * * 九、糖蛋白及其糖链 （一）糖蛋白的存在和含糖量 许多膜蛋白和分泌蛋白都是糖