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(公开课)分解尿素细菌、分解纤维素微生物分离
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 四、结果分析与评价 四、结果分析与评价 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过70亿吨,其中40%-60%能被土壤中能产生纤维素酶的微生物所利用,不会大量积累。 在草食性动物等的消化道内,也共生有分解纤维素的微生物,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的能力。 人类可应用分解纤维素的微生物将秸秆等废弃物转变成酒精,用纤维素酶处理服装面料等。 3、纤维素的分解 请用一个简单的实验来验证此问题 纤维素酶水解滤纸实验 → 1U表示1个酶活力单位,是指在温度为25℃,其他反应条件,如pH等,均为最适的情况下,在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。 底物:酶所作用和催化的化合物。 试管 A B 滤纸条 1cm x 6cm 1cm x 6cm 缓冲液 10ml 11ml 纤维素酶 1ml / 振动 1h 1h 现象 分解 不分解 纤维素酶的作用对照实验 (2)纤维素分解菌的筛选 1、筛选纤维素分解菌的方法______________。该方法可以通过________反应直接筛选。 刚果红染色法 颜色 2、其原理是:刚果红可以与纤维素形成____________,但不能和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被_________分解后, 红色复合物无法形成,出现以_____________ 为中心的________,可以通过___________________________ 来筛选纤维素分解菌。 红色复合物 纤维素酶 纤维素分解菌 透明圈 是否产生透明圈 实验原理 即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌 练一练: 1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是 A. 纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖 2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是 A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈,则说明已筛 选出了纤维素分解菌 (三)、实验设计 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别培养基 挑选菌落 什么样的环境取样? 培养的目的? 挑选什么样的菌落? ①鉴别培养基的特点? ②如何鉴别? 根据:微生物对生存环境的要求,到相应环境中去找; 目的:增加纤维素分解菌的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物; 刚果红染色法 对比课题3与课题2实验流程, 说说它们的不同之处: 课题2——土壤取样,直接稀释。 课题3——土壤取样,选择培养, 增加纤维素分解菌浓度后,再稀释。 1、纤维素分解菌选择培养基属于______(固体、液体)培养基,原因是__________ 【资料二】选择培养 阅读资料二“选择培养”,回答以下几问题: 液体 没有添加琼脂 2、该培养基对微生物_____(具有,不具有)选择作用。如果具有,其选择机制是 ___ 具有 能分解纤维素的微生物可利用纤维素作为碳源而大量繁殖;其他微生物繁殖被抑制 ①分布环境 1、土壤取样: 富含纤维素的环境中 操作步骤 生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 ②原因 将滤纸埋在土壤中有什么作用?你认为滤纸应该埋进土壤多深? 将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集,实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右的腐殖土壤中。 提示:自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。 A、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基?为什么? 是液体培养基,原因是配方中无凝固剂(琼脂) B、你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用 说明:分析“纤维素分解菌的选择培养基配方”可知,该配方中的酵母膏也能够提供少量的碳源,因此其他微生物也能在该培养基中生长繁殖。只不过,由于酵母膏的含量极少,因此,只有以纤维素为碳源的微生物才能大量繁殖。 〖旁栏思考题〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物? 在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“浓缩”的作用。 指微生物的种类少了,而某些微生物的数量多了 方法 现象 原理
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