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伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究-药理学专业论文
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年 月 日 年 月 日
宁夏医科大学硕士论文中文摘要
宁夏医科大学硕士论文
中文摘要
伏毛铁棒锤有效部位对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的初步研究
摘 要
目的 探讨伏毛铁棒锤有效部位对实验性类风湿性关节炎(RA)的治疗作用及作用 机制。
方法
1. 采用溶剂法对伏毛铁棒锤进行提取,利用大孔吸附树脂、阳离子交换树脂技术对 伏毛铁棒锤有效部位进行富集;采用紫外分光光度法对伏毛铁棒锤非生物碱有效部位总 黄酮类成分进行含量测定。
2. 通过 MTT 比色法观测伏毛铁棒锤有效部位、有效成分对小鼠脾淋巴细胞增殖反 应的影响。
3. 雄性 SD 大鼠 72 只,体重 180 士 20 g,随机分为 9 组。除空白组外,其余各组 大鼠右后足垫皮内注射完全弗氏佐剂(Freund’s Complete Adjuvant,CFA)制备大鼠佐剂性 关节炎(adjuvant arthritis, AA )模型。造模后第 8 天开始灌胃给药,每日一次。30%醇部 位高、中、低剂量组以 30%醇洗脱部位的溶液(60,30,15 mg/kg)灌服;非生物碱部位 高、中、低剂量组以非生物碱部位溶液(120,60,30 mg/kg)灌服;阳性药对照组以雷公 藤多苷片混悬液(9.45 mg/kg)灌服;空白对照组、模型对照组以 0.5%的 CMC-Na 水溶液 灌服。连续灌胃给药 21 天,于末次给药 2 h 后对大鼠进行相应处理。
4. 采用 HE 染色、关节肿胀度、多发性关节炎指数、体重等指标对大鼠 AA 模型制 备进行评价,并利用上述指标观察伏毛铁棒锤有效部位对 AA 大鼠的治疗作用。
5. 利用 ELISA 法检测 AA 大鼠血清中的 IL-1β、IL-2、IL-4 、IL-5、IL-6、IL-17 及 TNF-α的含量;免疫组化法(Immunohistochemistry, IHC)观察血管内皮生长因子(vasc ular endothelial growth factor, VEGF)和基质金属蛋白酶-3(Matrix metalloproteinases-3,
MMP-3)在滑膜组织中的表达情况。 结果
I
1. 伏毛铁棒锤干燥块根 3 kg 经提取后得到了粗提浸膏 0.3 kg,大孔吸附树脂富集
到了 30%醇部位 12.3 g,得率为 4.1%;取 30%醇部位浸膏 8 g,通过阳离子交换树脂分 离,得到非生物碱部位 4 g,得率为 50%。
2. 伏毛铁棒锤原药材中总黄酮含量为 1.2%,大孔吸附树脂 30%乙醇洗脱部位中总 黄酮含量为 9.6%;经阳离子交换树脂分离,得到的非生物碱有效部位总黄酮含量为 29.26%。
3. 蒙花苷(0.05,0.01 mg/kg), 30%醇部位(3.12 g/kg)可明显抑制 ConA 诱导的小鼠 脾淋巴细胞增殖反应(p0.05)。
4. 伏毛铁棒锤大孔吸附树脂 30%醇部位(60,30 mg/kg)、非生物碱部位中剂量组(6
0 mg/kg)灌服,可减轻 AA 大鼠继发性足肿胀(p0.05),显著降低大鼠多发性关节炎指 数(p0.05),缓解 AA 大鼠体重的下降(p0.05),同时明显减轻病变关节滑膜炎症与增生、 防止关节软骨及骨质的破坏。
5. 伏毛铁棒锤 30%醇部位(60,30 mg/kg)、非生物碱部位中剂量组(60 mg/kg)抑制 AA 大鼠血清中炎性细胞因子 IL-1β、IL-4 、IL-5、TNF-α、IL-6 分泌(p0.05),提高 I L-2、IL-17 含量(p0.05)。
6. 伏毛铁棒锤大孔吸附树脂 30%乙醇洗脱部位(60,30 mg/kg),非生物碱部位中剂 量组(60 mg/kg)可下调 VEGF 在血管壁的表达
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