customer病毒去除.pptVIP

赛多利斯公司与用户进行研发和临床前研究 研究紫外光照对目标蛋白的影响 在赛多利斯公司或用户处进行 单体 活性 裂解 理化分析SDS 电泳, HPLC, 二维凝胶电泳... 赛多利斯公司与用户进行临床研究 1st 生产Ｉ期临床样品前进行病毒挑战研究 2nd 生产III 期临床样品前进行病毒挑战研究 病毒灭活研究 内容概要 Virus Filtration Virus Inactivation 病毒吸附 Regulatory Aspects 膜层析技术: 基本原理 膜层析产品与颗粒胶电镜照片对比 孔径 – 颗粒胶与层析膜对比 - 颗粒胶 颗粒胶粒径分布为： 15 -160 μm 孔径分布为：　　 15 - 40 nm 层析膜 高开孔结构 孔径： 250 - 3000 nm 膜层析技术: 基本原理 “不是过滤膜” 开放孔结构 3 μm 低压力降 单纯的对流传质 扩散效应最小化 应用于去除：宿主细胞蛋白，DNA，内毒素和病毒 膜层析产品与颗粒胶电镜照片对比 病毒去除至少 3 - 4 log，并且蛋白收率 95% 相关的特定和非特定的标准病毒去除特性 物质平衡和独立的吸附机制 具有可放大性 膜层析系统应验证考察的方面 层析膜形成层析床 单张层析膜厚度0.275 mm 最多 60层叠加形成16mm厚柱床 36cm2 膜面积= 1ml 床体积= 30mg 载量 膜床体积： 1μl 到2.1ml 载量：　　　　　 30μg到 60mg 抛弃型技术 捕获，精致和病毒去除 膜层析 –抛弃型实验室规模产品 - 膜层析 – 生产规模抛弃型产品 - 膜床体积： 7ml 到 530ml 载量：　　　　　 0.2 到16g 抛弃型技术 捕获，精致和病毒去除 膜层析 – 可重复使用产品 - 膜床体积： 35ml 到 2.130ml 载量：　　　　　 1 到 64g 反复使用技术 捕获和精制 膜层析去除病毒 病毒 粒径(nm) 包膜 Sartobind Q 去除因子 (log10) 　　　　　　　Run 1 Sartobind Q 去除因子 (log10) Run 2 SV-40: Simian Virus -40 45 no 1.25 ? 0.46 1.34 ? 0.43 Reo-3: Reovirus Type III 75-80 no 4.07 ? 0.50 3.62 ? 0.42 MuLV: Murine Leukemia Virus 80-110 yes 3.80 ? 0.39 4.40 ? 0.56 PRV: Pseudorabies virus 150-250 yes 3.97 ? 0.44 3.88 ? 0.38 Galliher, P., Fowler, E., Millennium Pharmaceuticals Inc.), “Validation of Impurity Removal by the CMAPATH-1H Biomanufacturing Process” IBC’s Biopharmaceutical Production Week, Paradise Point Resort – San Diego, CA, November 12-15, 2001 膜层析去除病毒 病毒 粒径(nm) 包膜 Sartobind Q 去除因子 (log10) 　　　　　　　Run 1 Sartobind Q 去除因子 (log10) Run 2 MMV: Minute Mouse Virus 16 - 25 no 6.67 ? 0.24 4.41 ? 0.37 Reo-3: Reovirus Type III 75-80 no 7.28 ? 0.30 7.53 ? 0.29 MuLV: Murine Leukemia Virus 80-110 yes 5.57 ? 0.25 6.29 ? 0.32 PRV: Pseudorabies virus 150-250 yes 5.67 ? 0.17 5.76 ? 0.23 Zhang R, Bouamama T, Tabur P, Zapata G, Gottschalk U, Mora J, Reif O. Viral Clearance Feasibility Study With Sartobind Q Membrane Adsorber for Human Antibody Purification. IBC’s 3rd European Event BioProduction 2004. Antibody Production Downstre