中药血清与血浆药理学方法商讨rochester.pptxVIP

;药理学实验分类 整体（在体，in vivo）：复方或单味的疗效，副作用 离体（体外，in vitro）：单体或单一组分的药理，毒理 半离体（半体内，ex vivo）： 单体或单一组分; 有效成分未确定的中药药理，毒理 ? 血清和血浆药理学方法属半离体实验 中药血清药理学方法系田代真一提出（现代东洋医学 1992） 中药血浆药理学方法系贺石林，葛金文等提出（中国药理学通报，2005；国外科学技术-中药现代化 2008） *罗焕敏的“血清药理学”与“血浆药理学”一文（中国药理学通报 2003）曽将未经抗凝全血直接离心20分钟后，所得的液体部分视为血浆， 这是一种误解。;;田代真一提出中药血清药理学方法的背景 日本的汉方研究工作者都是中西医结合型专家，不可能缺乏生物医学基本知识。 可以设想：他们应该知道正常人与非DIC病人体内血液中真实存在的液体成分是血浆，而不是血清；从胃肠道吸收的中药成分是进入血浆，并非血清。 联系当时历史条件的局限性，许多人认为血浆等于血清加纤维蛋白原。他们提出中药血清药理学方法很可能是不了解血浆与血清的实际差异。 随着科学与技术发展，时至今日，血浆与血清多方面的差别已逐步揭开。;;;;;;;Crosstalk of coagulation complement systemsMASP-2—mannan-binding lectin associated serine protease; MAC—membrane attack complex(Amara U, et al., J Immunol 2010; 185:5628-5636);;;8，凝血和相关过程对核酸类的影响 （1）RNA与刺激与损伤血细胞，引起血清中RNA DNA在6小时内不断上升。6小时后RNA逐步被酶解。 （2）miRNAs：它们具有调控基因表达的作用，新近研究很受关注。正常血浆中miRNA含量很低，但血清中miRNA显著升高。这些miRNAs主要来自血小板释放和解体, 诸如MiR -16, MiR -20b, MiR -21, MiR - 24, MiR -92a, MiR -122, MiR -124, MiR – 126, MiR -141, MiR -142, MiR -150, MiR-191, MiR 197, MiR -205, MiR -210, MiR 223, MiR -451, let-7a, U-6。它们已成为监测血小板活化程度和抗血小板有效性的重要指标。（Wang K, et al., 2012; Willeit P, et al., 2013; Cheng HH, et al.,2013）;9， 凝血和相关过程对重要活性物质的影响 （1）生长因子：来自血小板释放PDGF,VEGF, EGF, CTAP,TGF-β等。 （2）氧化与抗氧化体系：N释放O-2 H2O2; Plt释放NO; 二者生成ONOO- ； 而RBC Plts释放GSH-Px, SOD, catalase, GSH-redutase(GR)。;（3） 细胞肽类（cytokines，细胞因子)： 在常测的15种细胞肽中，血清的IL-6含量明显低于血浆，CXCL-8含量明显高于血浆。 肝素抗凝血浆对细胞肽类检测的稳定性最好。 （de Jager W, et al., 2009; Considerations for measuring cytokine levels in serum or plasma. Posted on May 28, 2013 by Andrea in PBMC Basics ） ;10, 凝血和相关过程导致血浆与血清蛋白、 及 肽类差异 ●二维凝胶电泳显示血清与血浆差异蛋白约53个，其中仅出现在血清中的有9个（Kim HJ, et al.，2007）； ●蛋白与肽组学研究发现血清中质谱信号约3000-7000，其中40%以上仅出现于血清中，并不见于血浆（Schulte I, et al.， 2005；Tammen H, et al.，2007）。（如将血清信号数量多视为优点是错误的） ● 39 例 Alzheimer’s 病(AD) 患者血清与血浆自身配对， 检测100 个蛋白，结果仅40个高度相关。（Huebinger RM., et al.,2012) ●HUPO和有关专家根据血浆与血清差异， 从反映体内实际情况考 虑 ，一致认为蛋白组学和肽组学研究应采用血浆。（Omenn GS, et al.，2005 2011；Thadikk