项目一血液标本采集与血涂片制备.pptVIP

临床检验工作流程与质量控制 临床检验在医学中的应用 毛细血管采血与静脉采血优缺点比较 血液标本的采集 优点：防溶血 防标本污染 防交叉感染 可多管采集 缺点：成本较高 血液标本的采集 一次性使用静脉采血针 瓶塞穿刺针套 （防止血液泄漏） 抗凝：用物理或化学的方法，去除或抑制某些凝血因子，阻止血液凝固。 血液标本的抗凝 物理方法抗凝：脱纤维蛋白 将血液注入到有玻璃珠的器皿中，转动，纤维蛋白缠绕凝固在玻璃球上，从而防止血液凝固成块。适用于免疫学检验、红斑性狼疮细胞和细菌培养血培养基的制备。 常用抗凝剂：枸橼酸钠、草酸钠、二草酸盐、乙二胺四乙酸二钠（EDTA)、肝素 抗凝剂(anticoagulant)：能够阻止血液凝固的化学试剂或物质。 一.枸橼酸钠（柠檬酸钠） 适用项目：凝血象检查、红细胞沉降率、 血液保养液 血液标本的抗凝 抗凝原理：与血中钙离子结合形成螯合物 二.草酸钠 三.双草酸盐抗凝剂 抗凝原理：与钙离子形成草酸钙沉淀。 适用项目：血细胞比容、红细胞(计数） 草酸钾(钠)使RBC皱缩，草酸铵使RBC胀大。 血液标本的抗凝 不适于血小板计数和白细胞分类计数 四.乙二胺四乙酸（EDTA）盐 抗凝原理：与钙离子结合形成螯合物 适用项目：EDTA-K2用于血细胞计数(ICSH) 血细胞比容测定 血液标本的抗凝 不适于凝血象检查及血小板功能试验。 五.肝素 适用项目：红细胞渗透脆性试验、血细胞比容测定 血液流变学检查、多种生化分析 抗凝原理：加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋 白酶，从而阻止凝血酶形成、抑制血小板聚集。 不适于白细胞计数及分类计数 血液标本的抗凝 血液标本的抗凝 柠檬酸钠抗凝（抗凝比例1：9） 用于凝血象检查 加入促凝剂，用于普通生化检查 EDTA-K2抗凝，用于血常规检查 肝素钠抗凝，用于血流变学检查等 柠檬酸钠抗凝（抗凝比例1：4） 用于红细胞沉降率的测定 1.毛细血管采血时应注意些什么？ 2.常用的血液抗凝剂有哪些？ 3.选择题： 1）新生儿做血细胞计数，多用下列哪个部位采血 A.手背 B.耳垂 C.足跟 D.左手无名指 2）关于毛细血管采血法，下列正确的是 A.耳垂血的红细胞、白细胞、血细胞比容结果 均比静脉血低10%左右 B.手指采血时流出的第一滴血即可用于检查 C.婴儿宜用耳垂或手指采血 ? 3）不与Ca2+作用,但能阻止血液凝固的抗凝剂是 A.草酸盐 B.EDTA-K2 C.肝素 D.枸橼酸钠 4）下列几种抗凝剂，哪种最适宜用于血细胞计数 A. 乙二胺四乙酸二钾(EDTA－K2) B.枸橼酸钠 C.草酸钠 D.草酸钾? 5）肝素作为抗凝剂,下列叙述错误的是 A.具有较强的抗凝能力 B.不影响血细胞体积 C.过量使用可引起白细胞聚集 D.适用于做白细胞分类计数 血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，特别是对于各种血液病的诊断具有重要的价值，近年来血细胞分析仪的广泛应用，血涂片的观察也可作为判断仪器结果的简易方法。 血涂片的用途：血细胞形态学检验、网织红、 寄生虫检验。 任务二 血涂片制备和细胞染色 一、手工推片法 将推玻片向1的方向稍抽回，当血液充满推玻片的宽度后，以一定均匀的速度向2的方向滑动。 图1-3 血涂片制备示意图（上：侧面观，下：正面观） 血涂片制备 推片 载玻片 血液 将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄） 一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明 涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号 李四 B 1 2 3 血涂片的观察 低倍镜观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱） 2. 细胞分布情况 油镜下分类计数：体尾交界处。 油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。 李四123 适宜 不适宜 不适宜 二、血液涂片染色 对细胞核 着色较好 对细胞质 着色较好 瑞氏染料的组成：由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成的复合染料溶于甲醇制备而成。 碱性染料：为阳离子染料，能接受质子，细胞核的染料。如亚甲蓝、天青。能结合酸性物质并染色，如淋巴细胞及嗜碱性粒细胞染成蓝色 酸性染料：为阴离子染料，能释放质子。如伊红。能结合细胞的碱性成分并染色，如血红蛋白、嗜酸性颗粒成分等染成红色。 （一）瑞氏染色法 固定着色合并进行，简便，染色时间短，WBC特异性颗粒着色较好，细胞核着色较差。 细胞染色原理： 一般以它们的