第五讲常见病原微生物检测.pptVIP

第五章 常见病原微生物的检测 禽流感病毒 布鲁氏杆菌 疯牛病病毒 炭疽杆菌 第一节 禽流感病毒 禽流感是禽流行性感冒（Avian　Influenza，AI）的简称，这是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。 一、生物学特性 1、形态学特点 禽流感病毒是正粘病毒，流感病毒属的一个成员。 禽流感病毒具有A型抗原,属于A型流感病毒,列为禽流感病毒类。本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝状,为多形性。其直径为80－120nm,表面有一层棒状和蘑菇状的纤突，有囊膜,囊膜下面有一层膜蛋白,紧紧地包裹着呈螺旋状对称的核衣壳。 2、禽流感病毒的分型 流感病毒分为三个不同的抗原型,即A、B、C三型。其中B、C两型仅能对人致病,A型可对人、猪、马和禽致病。 依据病毒表面的两种糖蛋白血凝素〈HA〉和神经氨酸酶〈NA〉可将A型流感病毒分成若干亚型。目前已有15种HA和9种NA。 ?3、抵抗力 对热的抵抗力较低，60℃10分钟，70℃2分钟即可致弱，普通消毒剂能很快将它杀死。 低温冻干或甘油保存可使病毒存活多年。 4、流行病学 禽流感在家禽中以鸡和火鸡及某些野禽的易感性最高，并呈急性致死性传染病。 鸭、鹅及其它水禽类的易感性较差，多为隐性感染或带毒，有时也能大批死亡。鸽子可带毒，但很少自然发病。 5、临床症状和病理变化 禽流感的症状极为复杂.根据禽类的种类〈鸡、火鸡、鸭、鹅及野鸟等〉以及病毒的亚型类别的不同，表现各种各样的变化：有最急性、急性、亚急性及隐性感染等。 潜伏期一般较短，通常为4－5天，体温急剧上升至43.3－44.4.c，精神沉郁、拒食、病鸡很快陷于昏睡状态，有些颈部出现向后扭转的神经症状。病鸡多呈急性死亡，有的也可能出现呼吸道症状，咳嗽、打喷嚏，气管出现咯音，流泪等症状，羽毛蓬松，产蛋率下降，死亡率高低不等。 二、诊断?? 1、病原的分离 病原的分离和鉴定可以从活体或尸体分离病毒。 用棉拭子法常可从活体的气管和泄殖腔中分离到病毒，可用不同大小的棉拭子擦取气管或泄殖腔，然后将拭子放入灭菌的保存液〈25－50%甘油盐水、肉汤或1000u/ml青霉素和10mg/mL链霉素的细胞维持液〉中。 病料的采取时间很重要,一般在感染初期或发病急性期采取。如转为后期则因机体已形成足够的抗体而不易分离到病毒. 2、病毒分离 通常用鸡胚来进行。 接种9－10日龄鸡胚尿囊腔，继续孵育48－72h。 如材料中含有病毒时，则接种48h鸡胚死亡，但在多数情况下初代分离时鸡胚多不死，为此需将经72h未死的鸡胚置冰箱内冻死后，收集尿囊液作第二代接种。如第二代接种的鸡胚仍不死亡，即可判定分离病毒为阴性。 三、介绍高致病性禽流感的其他知识 鉴定高致病性禽流感的标准:??? 最近国际上评价禽流感病毒致病力的经典方法是接种易感鸡。按照国际标准，能引起接种鸡死亡75％以上的分离株，是高致病性毒株。尽管接种鸡是确定致病的“黄金标准”，但它不能反应致死率小于75%的H5或H7亚型病毒的潜在致病力。因此0IE(国际兽疫局〉根据科学家的建议,推出新鉴定标准。??? 1 任何分离到A型流感病毒，用0.2mL1:10稀释的无菌尿囊液静脉或肌肉注射8只4－8周龄易感鸡,10天内的死亡率不低于75%。??? 2.对所有低致病的H5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列与高致病性禽流感病毒一致。??? 3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。 禽流感的传播途径是什么？ 禽流感的传播有病禽和健康禽直接接触和病毒污染物间接接触两种。 禽流感病毒存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道和禽体脏器组织中。因此病毒可随眼、鼻、口腔分泌物及粪便排出体外，含禽病毒的分泌物、粪便、死禽尸体污染的任何物体，如饲料、饮水、鸡舍、空气、笼具、饲养管理用具，运输车辆、昆虫以及各种携带病毒的鸟类等均可机械性传播。健康禽通过呼吸道和消化道感染，引起发病。 如何防范禽流感 禽流感被国际兽疫局定为Ａ类传染病，且变异后的病毒能威胁人类健康，但各国专家们说，及时、适当的预防措施可以使人类避免感染。 ?1、避免直接接触病禽及其排泄物、分泌物等能有效防止感染病毒。 ?2、饲养员、屠宰工人等经常与活禽密切接触的人，必须做好保护工作，包括穿防护服、佩戴防护用具、及时接种流感疫苗、工作前后彻底消毒等。 3、注重自身健康、保持良好的免疫力也是避免感染禽流感病毒的有效措施。 4、不要去疫区旅游。 5、食用烹熟的家禽肉、蛋不会传染禽流感。 禽流感与其他流感有什么关系？ 除禽流感以外，常见的流感还有人流感、马流感和猪流感等。禽流感与人流感和人类健康的关系非常密切。由于猪与人的种间差异较小，禽流感病毒