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中华人民共和 国国家标准
UDC 633.1:543-05
谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法 GB7649- 87
Pretreatmentmethodfordetermination吐 amino
acidsincerealgrains
1 适用范围
本标准适用于氨基酸分析仪测定谷物籽粒中氨基酸含量的样品前处理。
2 方法原理
谷物籽粒中的氨基酸.系按一定顺序结合成不同类型的肤和蛋白质,因而在测定前要用一定浓度的
酸使蛋白质中肤键断裂,水解成多种氨基酸后,用氨基酸分析仪测定.由于色氮酸在酸性溶液中水解时
易被破坏,须用碱水解。
3 仪器设备
3.1分析天平:感量0.00018,
3.2 实验室用粉碎机。
3-5 喷灯。
3.4 真空泵。
3.5 真空规。
3.6 恒温干燥箱。
3.7 水解管:用九五料玻瑞制的球形管或圆底试管。体积 15^-20ml,
3.8 聚四氟乙烯管;loxl00mm,
3.9 玻璃试管:015X180mm,
3.10 浓缩器(可控温,减压)或真空干燥器。
3.11 容量瓶:25ml,
4 试荆
除注明者外均为分析纯。配制试剂均用去离子水,电导率大于1m。一‘。
4.1 6mol/L盐酸:盐酸(GB622-77),优级纯,与水按1,1混合。
4.2 4mol/L氢氧化铿:用水溶解168.8g氢氧化理(Q/HG12-325-83),稀释至1000m1;
4.3 pH2.2缓冲液:19.6g柠橄酸三钠(HG3-1298-80)用水溶解后,加入16.5m1盐酸(GB622
优级纯),5ml25写硫代双乙醉,lg苯阶(HG3-1165-78),最后定容至1000m1,
一 77,
4.4 pH4.3缓冲液:14.718柠椒酸三钠 (HG3一1298一80)和2.92g氛化钠 (GB1266一77),
10.508柠檬酸 (HG3-1108-81),溶解在500ml水中,再加入5ml25 硫代双乙醇,0.1ml辛酸,最
后定容至l000mla
4.5 冷冻剂:液氮或干冰加丙酮(或加乙醇)。
中华人民共和国农牧渔业部1987-03一26批准 1987一11一15实施
GB 7649一 87
5试样制备
5.1取有代表性的样品,用四分法分取25g左右,拣去杂质,带壳籽粒进行脱壳。
5. 2将样品放在60 65℃恒温干燥箱中。干燥8h左右冷却后在粉碎机中碾碎,全部通过孔径为
0. 25mm的筛子,充分混匀后装入磨口瓶中备用。
6 处理方法
6. 1酸水解步驻
6.1.1 称样
称取样品30士5mg,准确至0. lmg,置于水解管中,同时另称样品按GB 3523- 83((谷类、油料作物
种子水分测定法》,测定水分含量。
6. 1.2 水解
在水解管内加人6mol/L盐酸l Oml,在距管口2cm左右处,用喷灯灼烧并拉一细颈。再将
管子放入冷冻剂中,冷却至溶液呈固体后取出,接在真空泵的抽气管上,使减压至7Pa蕊5 X 10-
mmHg)后封口。
6. 1.2.2 将封好口的水解管放在110士1℃的恒温干燥箱内,水解22-24h后,取出冷却。
打开水解管,将水解液定量转移到25m1容量瓶内,定容过滤,吸取滤液I ml,用旋转浓缩器
(4550C)或置于真空干燥器内真空干燥,残留物用1--2m1去离子水溶解蒸干,如此反复进行1-2
次,最后一次蒸干后,加pH2. 2缓冲液溶解,供仪器测定.
6.2 砚水解步钾
B-2. 1 称样
称取样品60 f 5mg准确至0. 1 mg,置于聚四氟乙烯管内,同时按GB 3523- 83测定水分。
6·2,2水解
6.2.2. 1在聚四氟乙烯管内加入4mol/L氢氧化锉lml,使样品均匀湿润,然后把管子放人玻璃试管
中,在玻璃管上端,离聚四氟乙烯管4-5cm处.用喷灯灼烧并拉一细颈,再放到冷冻剂中,冷却至溶液
呈固体后取出,接在真空泵的抽气管上,减压至7Pa(5X 10- mmHg)后封
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