禾草类内生真菌生物碱含量及其与真菌生物量相关研究-生态学专业论文.docxVIP

南开大学硕士学位论文 南开大学硕士学位论文 禾草类内生真菌生物碱含量及其与真菌生物量相关研究 摘 要 以往对内生真菌一禾草共生体的研究已经较为系统地阐明了内生真菌的存 在对宿主植物在逆境胁迫下的增益作用，下一步人们努力的目标是将内生真菌转 接到其原宿主的近缘植物中，改良更多的牧草和草坪植物，使其适应更广泛的环 境条件，同时对内生真菌进行有效的改造以去除其产生的对牲畜有害的生物碱并 保留对昆虫有阻遏作用的生物碱。 这些研究需要我们掌握内生真菌转接方法；不同生境下内生真菌感染的植株 不同部位内生真菌生物量的检测方法：对内生真菌改造前后和转接前后其产生的 生物碱的种类和数量的变化进行检测的方法等技术手段。 本文以内生真菌感染(EI)的黑麦草、高羊茅的种子、叶鞘和人工培养基上 分离培养的内生真菌为研究对象，以麦角固醇含量对真菌生物量的指示方法，对 真菌生物量和麦角固醇之间的相关关系进行了探索；建立起不同菌株在不同培养 基条件F的麦角固醇～真菌生物量转换因子(E．FB ratio)，并就菌株、培养基和 菌龄对E—FB转换因子的影响进行了探讨；检测了若干品种的EI黑麦草种子中 麦角固醇含量；首次提取、检测了黑麦草叶鞘组织中麦角固醇的含量。并以麦角 固醇含量结合E．FB转换因子对内生真菌一禾草共生体中内生真菌生物量进行了 估测。 应用高效液相色谱和质谱等手段，对麦角缬氨酸在不同染菌植物不同部位的 分布与含量进行了分析和讨论，并在美国密苏里大学George Rottinghaus教授的 帮助下，对提取、纯化和检测麦角缬氨酸的方法进行了探索。 关键词：麦角固醇麦角缬氨酸内生真菌生物量生物碱 南开大学硕士学位论文 南开大学硕士学位论文 禾草类内生真菌生物碱含量及其与真菌生物量相关研究 Abstract The improvements brought by endophytes to host plants in stress conditions have been studied systematically．The next step is to inoculate the endophytes into genetically related plant species in order to form nexv endophyte-grass associations which will adapt to a different habitat．At the same time，the harmful alkaloids produced by endophytes will be eliminated and the useful ones will be remained through the modification of endophytes． To make advancements in this research we must develop and master some techniques including endophyte inoculation，endophytic fun#biomass estimation and alkaloids determination． Endophyte infected seed and sheath ofLoliumperenne and Festuca arundinacea， and isolates of endophyte on the artificial medium were employed in this thesis to develop the methods to extract．purify and detect the ergoterol content．Ergosterol content of endophytic mycelium was highly correlated to the endophytic fungal biomass．The different E—FB(ergosterol—fungal biomass)ratios were established for respective endophytic strains on the different medium and the effects of different strains，medium and strain age on the E·FB ratio were discussed．Ergosterol content was detectedin seeds