课件：内毒素与真菌葡聚糖检测的临床意义.ppt

二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 侵袭性真菌感染（IFI）现状 IFI发生率不断增加； IFI感染病死率很高； IFI诊断困难及漏诊情况严重。 1981 1986 1991 1996 0.6 0.4 0.2 0.0 每10万人中的发病率 美国非艾滋病患者中致死性真菌感染的发病率 Mc Neil et al 2001 Clin Infect Dis 33;641 念珠菌病 曲霉菌病 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 中国感染与化疗杂志2008 年7 月20 日第 8 卷第4 期 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 美国四大医疗中心做的一项回顾性研究 死亡率(%) 诊断延迟时间(d) Garey KW et al. Clin Infect Dis 2006, 43:25–31 . 微生物学标准 : （1）痰或支气管肺泡灌洗液培养呈霉菌 （2）鼻窦抽取液直接镜检或细胞学检查，或培养呈霉菌阳性； （3）痰或支气管肺泡灌洗液经直接镜检或细胞学检查发现霉菌或隐球菌； （4）支气管肺泡灌洗液、脑脊液或2份以上的血液样品呈曲霉菌抗原（半乳甘露聚糖检测、GM试验）阳性； （5）血液中(1,3)-β-D葡聚糖检测（G试验）阳性； （6）血中隐球菌抗原阳性； （7）无菌体液中经直接镜检或细胞学检查发现真菌； （8）未留置尿管的情况下，连续2份尿样培养均呈酵母菌阳性或尿检见念珠菌管型； （9）血培养呈酵母菌阳性； （10）肺部异常，与下呼吸道感染相关的标本中（血液、痰液和支气管肺泡灌洗液等）多次培养无任何致病细菌。 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床价值 早期诊断:先于临床诊断平均4天 敏感性和特异性:确诊和高度疑似的感染病例 单次阳性的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为100%、82%、40%和100%。 两次阳性的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为60%、93%、50%和95%。 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 早期诊断：侵袭性真菌感染增多且复杂，早期症状无特异性，往往被原发病掩盖，病程长，发现较晚，死亡率高。因此对深部真菌感染治疗成败的关键在于早期诊断。 指导用药：快速确定真菌感染后，选择好治疗方案,有针对性使用抗真菌类药物。为临床选用副作用小，疗效高，价格适宜的药物提供准确的依据。 评价效果：应用抗真菌药物后，定期检测血浆中葡聚糖浓度变化，评价选用药物的有效性。 监护病程：监护深部真菌感染易感人群的病发状态。 动态观察：易感人群，监测临床疗效。 真菌(1-3)- β-D-葡聚糖结果判断 二、真菌(1-3)-β-D-葡聚糖的临床应用 细菌内毒素测定试剂盒（动态浊度法）的临床应用 1、假阳性因素： 污染：操作环境及操作过程中污染，可能造成假阳性； 药物：应用某些抗生素如β-酰胺内酯类、氨基糖苷类和喹诺酮类等患者； 多糖：葡聚糖（10pg,Tn1）能激活试剂旁路（G途径），当葡聚糖含量过高，处理液不能全部处理时，常规的内毒素实验也呈阳性； 蛋白质：阳离子蛋白如溶菌酶、核糖核酸酶A及人免疫球蛋白G均能与内毒素形成细菌内毒素——蛋白复合体，对细菌内毒素有显著的屏蔽作用而影响测定细菌内毒素的结果。此外，血红蛋白与LPS结合可改变LPS的一些物理特性，从而增加LPS的生物学活性及LPS与LAL的作用。人血红蛋白、球蛋白、抗凝血酶Ⅲ均可以造成假阳性结果。 2、假阴性因素： 离子：离子对内毒素测定结果影响很大。一方面，高浓度的离子会引起内毒素的聚集，使内毒素不易解聚；另一方面，试剂中的C因子必须在二价阳离子的参与下才能被激活形成活化C因子，当溶液中存在维生素、添加剂、右旋糖酐-40、抗凝血剂时，可能干扰试剂形成凝胶。 1、假阳性因素（G试验）： 污染（故试验应采用无热原试管、枪头和蒸馏水等）； 利用纤维膜进行血液透析患者； 纱布或其他医疗物品（外科手术）中含有葡聚糖； 某些品牌的静脉制剂（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白）； 某些细菌败血症患者（尤其是链球菌败血症）； 某些疾病导致病人自身丙种球蛋白增高； 使用多糖类抗癌药物、放化疗造成的粘膜损伤导致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌经胃肠道进入血液等也可能造成假阳性。 2、假阴性因素（G试验）： 隐球菌、接合菌感染的患者 使用某些抗真菌药物（卡泊芬净：可非竞争性抑制1-3-β-D葡聚糖的合成） 标本放置时间过长 真菌(1-3)- β-D-葡聚糖测定试剂盒（动态浊度法）的临床应用 采集注意事项 采样过程要求无菌操作 常