环巴胺的提取分离及其制备-食品科学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘 要 藜芦（Veratrum Linn.）是百合科（Liliaceae）植物，世界上大约有 40 多种， 分布于亚、欧、北美洲。藜芦有多种药用功效，近年来发现藜芦属植物中含有 的环巴胺对多种肿瘤都有良好的抑制作用，因此，环巴胺作为一种新型的抗癌 药物在全球引起了高度重视。我国盛产藜芦，但是对于藜芦中环巴胺的提取分 离工艺研究极少，阻碍了我国对新型抗癌药物的研究。 本文主要研究了环巴胺的提取纯化及其制备，首先找出了合适的提取生物 质，找出了合适的环巴胺检测条件，再对环巴胺的提取进行单因素实验、响应 面实验的提取优化，然后进行单因素和正交实验对提取得到的环巴胺粗品进行 柱层析分离纯化的工艺进一步优化，得到纯品环巴胺的同时得到环巴胺的制备 原料介芬胺。最后，利用经典的黄鸣龙反应由介芬胺合成制备环巴胺。本研究 创新在于高效利用了藜芦原料，提取分离的工艺优化与制备相结合，提高了环 巴胺的产率，主要研究内容及得到的相关结论如下： （1）探索得到了较好的环巴胺检测条件：WATO-54275 C18 柱（250mm× 4.6mm，5μm）；流动相：0.01%三氟乙酸（A）和乙腈（B）；分析时长：25min； 流速：1.0mlL/min；检测波长：215nm；柱温：25℃；梯度洗脱：0-12min：90%-70% （A）；12-18min：70%-70%（A）；18-23min：70%-35%（A）；23-30min：35%-35% （A）。 （2）在四种常用药用藜芦中找到了合适的环巴胺提取生物质：发现在毛叶 藜芦中含有丰富的环巴胺，通过高效液相色谱检测环巴胺标准品绘制环巴胺标 准曲线，并得到毛叶藜芦中环巴胺的含量约为 0.076%。 （3）采用响应面法优化了从毛叶藜芦中提取环巴胺的条件：在单因素实验 的基础上选取提取液料比，提取时间和提取温度为随机因子，探究对环巴胺的 提取的影响，各因素对环巴胺提取率的影响程度大小依次为：提取液料比 A（p ＜0.0001，极显著）＞提取时间 B（p=0.0009，极显著）＞提取温度（p=0.0035， 极显著）。并确定了最佳的提取工艺参数为：提取液料比 9:1（mL/g），提取时 间 10.0h ，提取温度 48.0℃。 （4）在单因素实验的基础上设计正交实验，优化了环巴胺柱层析纯化条件： I 以洗脱剂的比例、上样量、流速以及上柱硅胶量为随机因子，进行正交实验， 得出因为当洗脱剂己烷：丙酮=65:35，上柱硅胶量为 80g，上样量为 12g，流速 控制在 6mL/min 下进行洗脱时，得到的环巴胺的纯度最高同时收率也是最高， 分别为 94.4%和 74.2%。再对纯度较高的环巴胺重结晶继续纯化，得到 97.2%的 高纯品环巴胺。 （5）通过柱层析分离纯化得到了介芬胺的纯品：在柱层析分离纯化过程中， 收集分离组份，通过质谱与核磁确定了介芬胺，并得到了介芬胺纯品。 （6）在单因素实验的基础上设计正交实验，得到了介芬胺制备环巴胺的优 化条件：以反应时间、反应温度、原料摩尔比、催化剂的量为随机因子进行正 交实验。考察对介芬胺制备环巴胺收率的影响。得出在使用二乙二醇为反应溶 剂、聚乙二醇 400 为反应催化剂、反应温度为 200℃、反应时间为 2h、反应原 料摩尔比 n（水合肼）：n（介芬胺）=2.5:1，催化剂的量占体积百分比为 3%时， 得到的环巴胺收率最高，可达到 80.8%，经柱层析法和重结晶纯化后，可以获 得纯度高达 98.3%的环巴胺。 关键词：环巴胺；提取；纯化；合成 II AB ABSTRACT ABSTRACT Veratrum linn is belonging to liliaceae, and there are about 40 different kinds of it, which distribute in Asia, Europe and North America. Veratrum linn has various effects of medicine, cyclopamine of it attracts worldwide attention for it is provided with well inhibition to diverse tumors which can be a new type of anti-cancer drugs. Veratrum linn is quite rich in China, however, our research of anti-cancer drugs is relatively backward for the lag of the extraction and separation