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禾谷镰刀菌中Hsp70热激蛋白基因的功能研究-植物保护专业论文
浙江大学硕士学位论文
浙江大学硕士学位论文 致谢
致谢
2013年考研面试时场景还历历在目,转眼间却要毕业了。回首在紫金港走过的时光, 无论是失败的沮丧还是成功的喜悦,现在想来都已化成了幸福美好的回忆。在毕业论文完 成之际,我要由衷的感谢这些年来一直朝夕相处、亦师亦友的老师、同学、朋友和家人, 谢谢你们!
首先,我要感谢我的导师马忠华教授。马老师渊博的专业知识、严谨的科研态度、崇 高创新的学术精神、勤勉的工作态度一直深深感染和激励着我。因材施教的科研措施,给 了我一个宽松自由的发展空间,很好的挖掘了我自身的潜能。科研上,导师在我迷茫的时 候给予了许多比较前沿的方向指导,帮助我能顺利的完成整个课题。除此之外,导师还让 我明白了生活上许多待人接物与为人处世的方法,教导我以身作则、诚实守信的做人态度。 总之,在研究生整个阶段中,导师让我获益匪浅,为我整个人生蓝图添上了很美好的一笔。 在此,向导师表示衷心的感谢!
其次,我要感谢陈云老师。在研究生生涯里,陈老师给了我许多科研上的宝贵意见, 尤其在科研的启蒙阶段,给我普及了很多实验基础知识,让我很快融入实验室,走上正轨。 此外,陈老师在生活上也给了我很大的帮助。
然后,我要感谢实验室的其他成员,感谢他们给我留下了一段美好的研究生生活的回 忆。在实验室成员中,首先要感谢跟我同一届进来的小伙伴们,我们一起实验、一起外出 骑行、相互调侃,在情绪低迷的时候相互发泄,度过了一段疯狂而美好的时光。其次要感 谢那些已经毕业和还没毕业的师兄和师姐,感谢他们零距离的试验指导和生活帮助,感谢 他们在我对整个环境感觉不适的时候给与的莫大关怀,让我学会了实验室的生活之道。还 要感谢我的师弟师妹们,感谢我们之间的试验合作,感谢我们之间的有借无还和有借有还, 感谢我们之间的相互认可与共同学习。此外,还要感谢本科生小伙伴,四块钱一份的葱油 拌面留下了一段美好而难忘的回忆。
接着,我要感谢一直陪我走到现在的初中同学、高中同学和本科同学。感谢他们的热 情好客,感谢他们的坦诚相待,感谢他们的相互吹嘘、相互调侃。有了你们,读研期间这 段路走的不再枯燥乏味。
最后,我要我感谢我的家人。体之发肤,受之父母。父母血溶于水的大爱再多的话也 无法表达。不管遇到什么挫折和困难,不管我成功或失败,他们都会默默的陪伴在我的身 边,他们永远是我最厚实的靠山。另外,还要感谢我姐对我学业上的支持与鼓励以及我女
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浙江大学硕士学位论文 致谢
朋友对我的体谅、鼓励和付出。 在此,再一次感谢以上陪我走过或长或短时光的老师、家人和同学们!
黄蒙蒙 2016年3月于紫金港
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浙江大学硕士学位论文 摘要
摘要
70 KDa热激蛋白(70 KDa heat shock proteins,Hsp70s)作为细胞内主要的一类分子 伴侣,参与了细胞内蛋白的折叠、降解和运输等过程,在细胞生长的整个周期中发挥重要 的功能。目前,人们对动物细胞中Hsp70s已进行深入研究,但Hsp70在植物病原菌中的
尚不清楚。通过生物信息学分析,我们在禾谷镰刀菌中检索到6个Hsp70同源蛋白并通过 敲除互补试验研究其生物学功能,结果如下:
(1) 基因敲除试验中成功敲了FGSG 00921、FGSG 08644和FGSG 01950共3个基因, 未能敲除的3个基因(FGSG 00838、FGSG 06154和FGSG 09471)可能是病原 菌生长所必须的基因。
(2) 三个敲除突变体AFGSG一0092 1(AFgSsb)、 AFGSG_08644(AFgSsz)和 AFGSG__01950(AFgSse2)掳4 现出严重的生长缺陷,即气生菌丝生长减少、产孢量 下降以及孢子畸形等生长缺陷。
(3) Co-IP和酵母双杂试验表明,FgSsb(FGSG一00921)和FgSsz(FGSG一08644)以间 接方式互作调控病原菌的生命活动。
(4) 药剂敏感性试验发现,AFgSsb和AFgSsz突变体菌株对多菌灵的敏感性均显著增加。 Co-IP试验、Western blot试验等进一步表明FgSsb和FgSsz可作用于p2微管蛋白, 进而调控病原菌对多菌灵的敏感性。
(5) 致病性测定发现,AFgSsb、AFgSsz和AFgSse2敲除突变体在麦穗上的致病力显著 下降,且DON毒素合成能力也显著下降。
上述结果表明,Hsp70蛋白在禾谷镰刀菌菌生长、致病、毒素合成和抗逆等方面发挥 重要作用。
关键词:禾谷镰刀菌;Hsp70;致病性;药剂胁迫
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浙江大学硕士学位论文 Abstract
Abstract
Hsp70s(70 KDa heat shock proteins)
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