课件：弧菌和弯曲菌.ppt

试验种类 空肠弯曲菌 胎儿弯曲菌 萘啶酸敏感试验 敏感 耐药 头孢噻吩敏感试验 耐药 敏感 马尿酸盐水解试验 ＋ － 醋酸吲哚水解试验 ＋ － 本病的预防在及时诊断和治疗病人，以免传播。加强卫生防疫及人畜粪便管理，注意饮食和饮水卫生。 本菌对多种抗生素敏感，常用红霉素、四环素、庆大霉素治疗。 患过霍乱的人可获得牢固的免疫力，再感染者少见。 病后小肠内可出现分泌型lgA。 由于霍乱流行迅速，且在流行期间发病率及死亡率均高，危害极大，因此早期迅速和正确的诊断，对治疗和预防本病的蔓延有重大意义。 （一）标本采集： 标本以粪便为主， 一般米泔水样便采取1－3ml，成形便采取蚕豆大小。 在某些情况下，亦可采取呕吐物和尸体肠内容物作检材。 1）动力观察：采取病人“米泔水样”大便或呕吐物制成悬滴片，观察细菌动力，可见流星或穿梭状动力的细菌。 2）制动试验： 标本， 霍乱多价诊断血清（效价1：64），用暗视野镜观察，3分钟内运动被抑制的即为阳性， 此法优点是快速而特异操作简便，但必须有数量较多的弧菌才检出。 3）涂片染色： 　　革兰氏染色阴性 　　并成鱼群状排列的弧菌。 1） 免疫荧光菌球法：将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中，经37℃4～6h，如有霍乱弧菌，在荧光显微镜下可见发荧光的菌球。本法适用于做大量标本的初筛。 2） SPA协同凝集试验：以霍乱弧菌IgG型抗体与SPA阳性葡萄球菌结合作为试剂，与米泔水样便或增菌液作玻片凝集，立即出现明显凝集者（＋＋＋）为阳性。 分离用的培养基有强、弱2种选择培养基。 弱选择培养基：碱性琼脂和碱性胆盐琼脂。 强选择培养基：常用的有庆大霉素琼脂、4号琼脂和TCBS琼脂等。 现多采用碱性蛋白胨水增菌，再用强选择培养基进行分离。 根据霍乱弧菌在各种选择培养基上的特点，挑选可疑菌落进行鉴定。鉴定以血清学（玻片凝集）为主，结合形态学、生化反应作出判断。 1） 玻片凝集试验：从分离培养基上挑取可疑菌落于霍乱弧菌多价诊断血清作玻片凝集试验。诊断血清应稀释成1:32-1:64的效价使用，立即出现凝集者为阳性，同时设生理盐水和阳性细菌株对照。 2） 形态学检查：取纯培养物涂片革兰氏染色，观察菌体形态及染色性。用悬滴法或半固体穿刺法检测动力。 3） 生化反应：霍乱弧菌氧化酶试验、靛基质试验、粘丝试验和霍乱红试验均阳性。 ①粘丝试验：用于测定霍乱弧菌形成粘丝的特性。将0.5％去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓厚菌液，1min内悬液由混变清，并变得粘稠，以接种环挑取时可以拉出丝来。霍乱弧菌古典生物型和El Tor生物型均呈阳性。 ② 霍乱红试验：出现蔷薇色，为霍乱红试验阳性。由于霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应，故无特异性。 　　（霍乱弧菌含有色氨酸酶，能分解色氨酸产生吲哚，霍乱弧菌液能还原硝酸盐为亚硝酸盐，因此当霍乱弧菌培养在含有硝酸盐成分的蛋白胨水中，所产生的亚硝酸盐可与吲哚结合成亚硝酸吲哚，滴加浓硫酸即可出现蔷薇色，称为霍乱红试验阳性） ③ O/129敏感试验：将O/129（2，4二氨基－6，7－二异丙基喋啶）药敏纸片（10－150μg）贴在接种有待测菌的琼脂平板上作纸片扩散试验，凡药物纸片周围出现抑菌环者为敏感。 4） 霍乱弧菌的分型鉴别试验： ①血清分型：用小川型和稻叶型单价诊断血清作玻片凝集。与小川型血清凝集而与稻叶型血清不凝集者为小川型，反之为稻叶型。在两个单价血清中均有明显凝集者为彦岛型。 ②生物型别的鉴定：目前，两型主要依靠第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验进行鉴别，并辅以多粘菌素敏感试验、鸡红细胞凝集试验、V－P试验和溶血试验。 ⒈ 第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验： 第Ⅳ组霍乱噬菌体常规稀释液（106/ml）一般仅裂 解古典型，而不裂解El Tor型。 ⒉ 多粘菌素B敏感试验： 取被检菌2-3h肉汤培养物点种到含药营养琼脂平板上（多粘菌素B50U／ml）,37℃培养24h，El Tor生物型生长，而古典型敏感。 ⒊ 鸡红细胞凝集试验：在玻片上滴加生理盐水一滴，取被检菌18-24h培养物少许在盐水中制成浓厚菌悬液，然后加一滴2.5％鸡红细胞悬液，充分混匀， 1min内出现凝集者为阳性，红细胞呈均匀分散者为阴性。El Tor生物型为阳性，古典型为阴性。 确诊O1群霍乱弧菌必须具备的条件： 1、涂片为革兰氏阴性弧菌或杆菌； 2、TCBS等选择培养基上典型的菌落特征； 3、动力阳性； 4、O1群霍乱弧菌诊断血清凝集试验阳性。 必须贯彻预防为主。 人群的菌苗预防接种，可获良好效果， 治疗主要为及时补充液体和电解质及应用抗菌药物如四环素、链霉素、氯霉素、强力霉素及氟哌酸类抗生素药物。 弯曲菌属(