规范《GB13091-1991-饲料中沙门氏菌的检验方法》.pdfVIP

中华人民共和 国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法 GB13091一91 Methodfordeterminationof Salmonella infeeds 本标准等效采用国际标准ISO6579-1981饲《料中沙门氏菌检验方法》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了饲料中沙门氏菌的测定方法。 本标准适用于配合饲料(包括混合饲料)和动物性单一饲料中沙门氏菌的检验。 2 引用标准 GB4789.1食品卫生微生物学检验 总则 3 原理 根据沙门氏菌的生理特性，选择有利于沙门氏菌增殖而大多数细菌受到抑制生长的培养基，进行选 择性增菌、选择性平板分离，以求检出饲料中的沙门氏菌。 4 设备和材料 4.1天平:感量1g，最大秤量1000g, 4.2 显微镜:1500X。 4.3 温箱:36士1C.43士10C。 4.4 冰箱:普通冰箱。 4.5均质器:8000 10000r/min, 4.6广口三角瓶:500mL. 4.7三角瓶:250mL. 4.8 水浴锅:45士10C,55士10C,77士1C。 4.9 吸管:1,5,10mL, 4.10 平皿:皿底直径9Cm, 4.11 电炉。 4.12 酒精灯。 4.13 接种棒:镍铭丝。 4.14 试管。 4.15 载玻片。 4.16 试管架。 4.17 干燥箱:50^-250士1C。 4.18 乳钵。 国家技术监督局1991-07-16批准 1992一04一01实施 GB13091一91 4.19 M度计，loono 4.20 高压灭菌器:2.5kg 5 培养墓和试荆 详见附录A(补充件)。 5.1 缓冲蛋白陈水。 5，2 四硫磺酸钠煌绿增菌液。 5.3 亚硒酸盐肌氨酸增菌液。 5.4 酚红煌绿琼脂。 5.5 DHL琼脂， 5.6 营养琼脂。 5，7 三糖铁琼脂。 5.8 尿素琼A6 5.9 赖氨酸脱狡试验培养基。 5.10 v-P反应培养基。 5.11肌酸溶液。 5.12 --禁酚乙醉溶液。 5.13 氢氧化钾溶液。 5.14 靛基质反应培养基。 5.15 柯凡克试剂。 5-16 P一半乳糖昔酶试剂。 5.17 半固体营养琼脂。 5.18 盐水溶液。 6 样品采集 参照GB4789.1的要求执行。 7 检验程序 沙门氏菌检验程序如下: Gs13091一91 检验样品25g 顶增菌培养荃 缓〔冲蛋白陈水))225.L. 在36-CC培养16-20h 取预场曲培养物lOmL接种于四硫砚吐钠煌姆增圈液中， 取预增曲培养物IO.L接种于亚硒酸盐跳氮酸增自液中， 在43C培养18-20h 在36i1C培养18一24h或48h 煌绿林脂 (平皿)3631Y培弃20-40h, DHL凉脂(平皿)3631C培养20-24h, 如有需要培养至相h 如有书要，培养至48h 每乎皿取5个有沙门氏留特征的自落， 接种在营养旅脂上，3621℃培养18一24h 生化鉴定 血清鉴定 结果报告 8 操作 8.1预增菌培养 取检验样品25g，加入装有225mL缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内(粒状可用均质器，以8000^- 10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎)。在