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中华人民共和 国国家标准
饲料中沙门氏菌的检验方法 GB13091一91
Methodfordeterminationof Salmonella
infeeds
本标准等效采用国际标准ISO6579-1981饲《料中沙门氏菌检验方法》。
1 主题内容与适用范围
本标准规定了饲料中沙门氏菌的测定方法。
本标准适用于配合饲料(包括混合饲料)和动物性单一饲料中沙门氏菌的检验。
2 引用标准
GB4789.1食品卫生微生物学检验 总则
3 原理
根据沙门氏菌的生理特性,选择有利于沙门氏菌增殖而大多数细菌受到抑制生长的培养基,进行选
择性增菌、选择性平板分离,以求检出饲料中的沙门氏菌。
4 设备和材料
4.1天平:感量1g,最大秤量1000g,
4.2 显微镜:1500X。
4.3 温箱:36士1C.43士10C。
4.4 冰箱:普通冰箱。
4.5均质器:8000 10000r/min,
4.6广口三角瓶:500mL.
4.7三角瓶:250mL.
4.8 水浴锅:45士10C,55士10C,77士1C。
4.9 吸管:1,5,10mL,
4.10 平皿:皿底直径9Cm,
4.11 电炉。
4.12 酒精灯。
4.13 接种棒:镍铭丝。
4.14 试管。
4.15 载玻片。
4.16 试管架。
4.17 干燥箱:50^-250士1C。
4.18 乳钵。
国家技术监督局1991-07-16批准 1992一04一01实施
GB13091一91
4.19 M度计,loono
4.20 高压灭菌器:2.5kg
5 培养墓和试荆
详见附录A(补充件)。
5.1 缓冲蛋白陈水。
5,2 四硫磺酸钠煌绿增菌液。
5.3 亚硒酸盐肌氨酸增菌液。
5.4 酚红煌绿琼脂。
5.5 DHL琼脂,
5.6 营养琼脂。
5,7 三糖铁琼脂。
5.8 尿素琼A6
5.9 赖氨酸脱狡试验培养基。
5.10 v-P反应培养基。
5.11肌酸溶液。
5.12 --禁酚乙醉溶液。
5.13 氢氧化钾溶液。
5.14 靛基质反应培养基。
5.15 柯凡克试剂。
5-16 P一半乳糖昔酶试剂。
5.17 半固体营养琼脂。
5.18 盐水溶液。
6 样品采集
参照GB4789.1的要求执行。
7 检验程序
沙门氏菌检验程序如下:
Gs13091一91
检验样品25g 顶增菌培养荃 缓〔冲蛋白陈水))225.L.
在36-CC培养16-20h
取预场曲培养物lOmL接种于四硫砚吐钠煌姆增圈液中, 取预增曲培养物IO.L接种于亚硒酸盐跳氮酸增自液中,
在43C培养18-20h
在36i1C培养18一24h或48h
煌绿林脂 (平皿)3631Y培弃20-40h, DHL凉脂(平皿)3631C培养20-24h,
如有需要培养至相h 如有书要,培养至48h
每乎皿取5个有沙门氏留特征的自落,
接种在营养旅脂上,3621℃培养18一24h
生化鉴定 血清鉴定
结果报告
8 操作
8.1预增菌培养
取检验样品25g,加入装有225mL缓冲蛋白陈水的500mL广口瓶内(粒状可用均质器,以8000^-
10000r/min打碎1min,或用乳钵加灭菌砂磨碎)。在
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