课件：抗体药物.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * ※由治疗药物与单抗（药物良好的靶向性载体）通过药物分子上特殊功能基团（羟基、巯基、氨基等）相连而得到，避免了药物对他正常组织的毒害作用，选择性地发挥治疗作用。 ※常与单抗进行偶联的药物，有阿霉素、柔红霉素、平阳霉素、博安霉素、丝裂霉素、新制癌菌素、氨甲喋呤等。 化 学 免 疫 偶 联 物 抗肿瘤单抗偶联物 ※放射免疫治疗（RIT）利用携带放射性核素的单克隆抗体特异地靶向肿瘤细胞，实现对肿瘤的近距离内照射治疗，减少了对正常组织的损伤。 ※90Y-ibri-tumomab是第1个被FDA批准应用于临床的放射免疫制剂，主要用于复发的淋巴瘤患者或对单独应用利妥昔单抗疗效不佳的患者。 放射免疫偶联物 抗肿瘤单抗偶联物 免 疫 毒 素 ※由肿瘤选择性单抗与经修饰的多肽毒素通过化学或基因工程方法共价连接而成。 ※可与肿瘤细胞表面受体或靶抗原相结合后内化，继而在胞内抑制细胞蛋白合成，导致肿瘤细胞死亡。 ※毒素（植物、毒素、动物毒素等）引用最广泛的是白喉毒素。 抗肿瘤单抗偶联物 ※奥马珠单抗（omalizumab） 通过与游离IgE结合而显著降低游离IgE的水平，阻断IgE与肥大细胞、嗜碱粒细胞结合，防止炎症介质的释放。 可显著改善哮喘病人的症状、肺功能及生活质量，减少哮喘恶化的发作次数，减少糖皮质激素的用量，使用安全，具有很好的耐受性。 ※利妥昔单抗 对类风湿和系统性红斑狼疮有很好的治疗作用。 治疗其他疾病的单抗药物 ※英夫利昔单抗 1)减轻类风湿性关节炎患者的临床症状（疼痛、晨僵、关节肿胀等),减轻程度可达60%。 2)输注英夫利昔单抗可快速、显著缓解顽固性银屑病、关节炎病人的关节和皮损症状，且在推荐的治疗范围内安全性良好。 治疗其他疾病的单抗药物 单抗药物的不良反应 ※曲妥珠单抗——过敏性休克、心脏毒性、精神症状； ※阿伦珠单抗——低血压、寒颤、发热、恶心、呕吐、气短、支气管痉挛、皮疹、疲乏、呼吸困难、头痛、腹泻、感染等； ※贝伐珠单抗——栓塞性疾病、胃穿孔、高血压、疲劳、白细胞数量异常、卵巢衰竭、下颌骨坏死和眼内炎等； ※英夫利昔单抗——结核、李斯特菌病、球霉菌病感染的风险增加2-7倍。在活动性结核患者停止治疗时可能出现结核病的反常反应； ※放射免疫偶联物——血小板减少、中性粒细胞减少。 抗体药物——基因工程药物 ※基因工程抗体是指以基因工程技术等高新生物技术为平台，制备的生物药物的总称。 ※用基因工程（多采用人抗体的部分氨基酸序列代替某些鼠源性抗体的序列）经修饰制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性及功能。 ※嵌合抗体药物：减少鼠源性抗体的免疫原性，具有高亲和力； ※单链抗体药物：抗体重链可变区通过连接肽连接，具有较好的抗原结合能力，分子量小、穿透力强、免疫原性低等特性； ※人源性抗体药物：鼠源性占极少量。 ※完全人源化抗体药物：将小鼠 Ig 基因代之以人 Ig 基因，再经杂交瘤技术产生大量完全人源化抗体。 ※双特异性抗体药物：具有两个不同抗原结合位点，具有双特异性。 基因工程药物的分类 ※通过基因工程技术的改造，可以降低甚至消除人体对抗体的排斥反应； ※基因工程抗体的分子量较小，可以部分降低抗体的鼠源性，更有利于穿透血管壁，进入病灶的核心部件； ※根据治疗的需要，制备新型抗体； ※可以采用原核细胞、真核细胞和植物等多种表达方式，大量表达抗体分子，大大降低生产成本。 基因工程药物的优点 抗体药物制备方法与技术 05 ※发展最成熟、应用最广泛； ※基本原理：将蛋白质分子或肽段的基因克隆到丝状噬菌体的基因组DNA中，与噬菌体的外壳蛋白形成融合蛋白。侵染宿主细菌，进而复制形成大量带有杂合外壳蛋白的噬菌体颗粒，直接用于捕获靶蛋白库中与编码蛋白相互作用的蛋白质。 编码基因 融合蛋白 与编码噬菌体 外壳蛋白连接 带有杂合外壳蛋 白的噬菌体颗粒 侵染噬菌体 富集、筛选 编码特异性 结合的基因 噬菌体展示技术原理示意图 优势： ※筛选容量大； ※可实现基因型和表型的统一； ※可选择出完全人源的抗体； ※经过多次“吸附-洗脱-扩增”的富集过程，可筛选到特异性的抗体基因； ※用途广泛。 限制： ※从未经免疫动物的抗体库获得的抗体亲和力不高； ※受外源基因转化率的限制，抗体库的库容不足以涵盖某种动物的抗体多样性。 突变体文库 体外转录/翻译 mRNA-核糖体-蛋白质三元复合物 筛选 配体耦合磁珠 RT-PCR 目的基因 PCR 克隆表达 优势 ※完全在体外进行 ※较噬菌体展示技术建库简单、库容量大、分子多样性强、筛选方法简便、无需选择压力,还可通过引入突变和重组技术来提高靶标蛋白的亲和力等优点,是一种筛选大型文