课件：免疫复合物及检测.ppt

优缺点： 该试验敏感，干扰因素多，易出现假阳性 凡引起补体失活的原因都可引起假阳性，因此豚鼠血清必须保持新鲜； 待测血清在56°1h灭活自身补体时，对其中的Ig构型有改变，可引起Ig聚集代替IC而与C1q结合，出现抗补体活性。 3.C1q结合试验： 原理：C1q＋IC 方法： 待测血清（灭活补体）＋同位素标记的C1q ↓PEG(使IC沉降） 测定沉淀物中的放射活性 优点：对IC的检测既可定性又可定量，重复 性好，结果客观； 缺点：易出现假阳性，C1q不但能与IC结合， 还能与血清中鱼精蛋白、C反应蛋白结合 4.血小板凝集试验： 原理：IC+血小板上的IgGFc 受体→血小板凝集 方法：待测血清＋血小板 若出现凝集，则待测标本中含有IC ； 若不出现凝集，则待测标本中无IC 。 特点：由于不同个体血小板对IC的敏感性不同，所以实际运用时，至少需要三份不同个体的混合血小板。 可出现假阳性：高浓度的Ig、凝血酶、蛋白溶解酶、胶原等都可使血小板凝集。 5.Raji 细胞试验： 原理：Raji细胞是一种有B细胞特征的淋巴母细胞样细胞，由Burkitt氏淋巴瘤衍变而来，其表面无SmIg，含有大量的补体受体，尤其是C3b受体。该法仅适用于检测AgAbC复合物。 方法：待测血清+Raji细胞 孵育→洗涤，加入同位素标记的抗人IgG →离心、洗涤→ 检测沉淀细胞的放射活性。 五.IC检测的有关技术问题： 到目前为止，所有检测IC 的试验，还没有另人满意的标准化措施； 在体外制备的IC还很不稳定，因此用人工合成的复合物作为定量标准不适宜。 目前普遍应用的标准品是HAHG——热聚合人IgG（不是真正的IC）。 检测IC的理想方法： 操作简便，敏感； 可检测各种类型IC； 能分析IC的大小和组成成分； 能精确定量，无假阳性 WHO推荐的检测方法： C1q结合试验、 胶固素试验、 类风湿因子（RF）试验、 Raji细胞试验 思考题: 免疫复合物的含义及免疫复合物病的致病原因 免疫复合物检测使用的标准品、出现的问题及WHO推荐的检测方法 免疫复合物及检测 当Ag在体内持续存在或由微生物与宿主细胞不断释放入细胞外液时， 可引起特异性Ab产生，从而形成免疫复合物。 一.免疫复合物含义及形成： （一）含义：immune complex，IC 它主要指AgAb复合物及AgAbC 复合物两种。 （二）IC的形成： 1.Ag持续存在于体内：（产生Ab，形成AgAb或AgAbC） 感染：是Ag持续存在于体内的最常见原因，如细菌、病毒、寄生虫感染； 组织Ag：自身组织的部分成分发生变异， 如DNA、IgG等； 外源性Ag：在生活、工作环境中接触的外来性物质如粉尘、药物等； 肿瘤Ag：如白血病等 2.IC的清除受阻： 形成的IC一般分为大分子IC、中等大小的IC及小分子IC三种： 大分子IC：沉降系数为19S，MW100万，易被巨噬细胞吞噬而清除； 小分子IC：可溶性，沉降系数6.6S，MW 50万，易被肾小球滤过而排除； 中等大小的IC：沉降系数在8.8S－19S间，MW在50－100万间，既不易被巨噬细胞吞噬也不易被肾小球滤过，而沉积在血管壁、肾小球基底膜处，形成免疫复合物病。 二.免疫复合物病： （一）致病机理：中等大小的IC沉积在体内，通过激活补体、激活血小板 而致病。 激活补体： a.激活C3a、C5a、C567→趋化嗜中性粒细胞→释放溶酶体酶→引起组织损伤； b.激活C3a、C5a（过敏毒素）→作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞→释放血管活性物质→血管通透性增加→引起组织水肿； 激活血小板： 与血小板上的IgGFc受体结合→使血小板聚集→微血栓形成→局部出血缺血、坏死 常见病损部位 肾小球、关节、皮肤 （二）所致疾病 内脏毛细血管炎：如急性肾小球肾炎、变态反应性肺泡炎、溃疡性结肠炎 关节炎：风湿性关节炎、类风湿性关节炎； 皮肤：皮肤炎、脉管炎； 全身：SLE 血 清 病 类风湿性关节炎 体内变性IgG刺激机体产生抗体(称为类风湿因子,IgM型)，形成IC，沉积于全身小关节滑膜处，引起小关节红肿、变形僵直、失去运动功能。 系统性红斑狼疮 细胞核物质(如DNA、RNA、核内可溶性蛋白)刺激机体产生抗核抗体，形成IC，沉积于全身毛细血管、关节滑膜、心脏瓣膜等处，引起全身性损伤。 三.IC检测方法的分类： (一) 局部组织中IC的检测