实验诊断学实验.ppt

实验诊断学实验1 * 实验室规章制度 1.遵守纪律,穿白大褂,不准吃东西 2.做好预习,严格按操作规程进行操作 3.如实记录并分析实验中出现的现象以及问题 4.认真分析实验结果 5.保持室内安静/清洁,结束后搞好卫生 6.认真做好实验报告,作为实验成绩 7.认真做好个人防护,注意实验安全 * 内 容 白细胞计数* 红细胞计数* 血红蛋白测定* 目前实验室血细胞测定方法 实验报告 * * 部位 指尖、耳垂、足根等 用血量 少（﹤0.5ml） 适用范围 窄（细胞计数 、Hb） 结果 不够稳定，不能重复 一般较静脉血高 影响因素 多（部位、气候、采血技术) 毛细血管采血法 * 器材：一次性采血针、微量吸管（10ul、20ul）、酒精、棉球 操作： 1.准备试剂、器材 2.选择采血部位消毒 3.针刺（迅速、深度2-3mm） 4.擦去第一滴血 5.吸取一定量血液 6.擦去管外余血 7.加入试剂底部中，用上清液 冲洗2-3次 毛细血管采血法 * 毛细血管采血法 注意事项: A.对严重烧伤患者,可选择皮肤完整处采血 B.严格实行一人一针制,避免交叉感染 C.注意穿刺的深度,切忌用力挤压,以免混入组织液,影响检验结果 D.微量吸管应校正后使用 * 红细胞计数(显微镜法) [试剂 ] (可用生理盐水) [操作] 取一小试管，加红细胞稀释液1.99ml。 用微量吸管采血10ul加入试管底部，用上清液吸洗2~3次，摇匀。 充池后静置2~3分钟待红细胞下沉后用高倍镜计数5个中方格内的红细胞数。 [计算] 5个中方格内红细胞数×5 ×10 ×106 ×200=红细胞数/L [注意事项] 红细胞在计数池内分布不均匀时应重新冲池 * . 白细胞计数(显微镜法) [试剂]冰醋酸 2.0ml,蒸馏水 98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴 [操作] 取一小试管，加白细胞稀释液0.38ml。 用微量吸管采血20ul加入试管底部，用上清液吸洗2~3次，摇匀。 充池后静置2~3分钟待白细胞下沉后用低倍镜计数4个大方格内的白细胞数。 [计算] 白细胞数/L=4个大方格内的白细胞数÷4×10×20×106 * 计数板 * 血球计数板的结构 计数池深度……0.100mm 计数池大格……1mm × 1mm 白细胞计数中方格……1/16mm2 红细胞计数中方格……1/25mm2 载玻片尺寸：24×20×0.6（mm） * * * [参考范围] 成人：4 ~10×109/L（4000~10000/ul） 儿童：5 ~12×109/L（5000~12000/ul） 新生儿：15~20×109/L（15000~20000/ul） [临床意义] 生物变异：人体体液物质围绕体内环境稳定调节点的自然波动过程，包括日、月、季节的生物变异。WBC 是 10.9% 增高：生理性：新生儿、剧烈运动、妊娠晚期、极度恐惧与疼痛。 病理性：大部分细菌性感染、尿毒症、烧伤、手术后、传染 性单核细胞增多症、白血病等。 减少：病毒性感染、伤寒、副伤害、疟疾、再生障碍性贫血、放疗、 化疗、非白血性白血病。 [注意事项] 1.一些贫血患者血液中出现有核红细胞会影响白细胞计数，应校正 排除。 2.加全血时，应檫去吸管外周血液,先吹入试管底部，再吸上清液回洗几次。 3.滴入计数室内的混悬液，液量要适当，不得外溢或混有气泡；计数室内的细胞分布均匀。 4.计数室边线的白细胞，可数上不数下，数左不数右，避免重复或漏计。 * * 血红蛋白测定(手工比色法) [试剂]血红蛋白稀释液(文-齐氏液) [原理]血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白,再与氰结合成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白,在540nm波长和液层厚度条件下,具有一定的吸光系数，根据吸光度，即可求得血红蛋白浓度。 [操作] 取一试管，加血红蛋白稀释液5.0ml。 用微量吸管采血20ul加入试管，用上清液吸洗2-3次，摇匀后静置5-10分