《以环糊精为添加剂的毛细管电泳法同时分离四个β2-激动剂对映体-对映体选择性机理的研究》-毕业论文设计（学术).docVIP

以环糊精为添加剂的毛细管电泳法同时分离四个β2-激动剂对映体-对映体选择性机理的研究 本文主要对毛细管电泳法同时分离分析四个肾上腺素β2-激动剂对映体（川丁特罗，马布特罗，克仑特罗，班布特罗）进行研究，主要用β-环糊精，乙基-β-环糊精，甲基-β-环糊精，羟丙基-β-环糊精，羟乙基β-环糊精作为手性添加剂。手性选择的种类和浓度及缓冲液pH值在对映体化合物的分离分析中发挥了非常重要的作用。与其它环糊精相比，羟丙基-β-环糊精被认为是最有效的络合试剂，用它做手性或非手性化合物添加剂经常会获得满意的分离度。本文在100 mM柠檬酸-10mM Na2HPO4作的缓冲溶液（含120 mM羟乙基β-环糊精，pH为2.5），分离电压20 kV电泳条件下，同时达到四个β2-激动剂对映体的分离。并且分别对它们进行方法学验证，包括线性，检测限和定量限考察。同时研究了被分析物结构特征对分离度和迁移时间的影响。进而对四个混合物和三个不同种类的环糊精之间的相互作用机理进行探讨。探讨了影响络合四个化合物和三个不同的CD之间的相互作用的结合常数对阐明的对映体的机制进行了评价。研究发现被分析物结构特征上的细微差别在立体选择性识别上将会产生很大的差异。 引言 在过去十年中，在手性分离的研究数量上出现了一个戏剧性的增加。除了高效液相色谱法和气相色谱，已经吸引了CE技术更大的兴趣对映体。相比其它技术，CE有几个好处：高分辨能力，低溶剂和选择消费，以及明显的灵活性和选择改变类型的选择。CE的方法是最经常采用同步分离方法对映体。同时对映体组成两个或更多的分离和决心对映体在色谱运行。它可以消除对发展个人的需要而为每一种化合物的检测。因此，这两个操作系统可显著降低成本和分析时间[1]。 肾上腺素β2-激动剂是家庭使用的药物为治疗哮喘或慢性阻塞性肺病疾病（COPD）的[2,3]，以及高血压，心脏衰竭，冠状动脉疾病[4]。多数β2-激动剂手性化合物，它们的对映体可能会出现不同的药理和毒理影响。它已被证明的支气管扩张马布特罗，克仑布罗，川丁特罗，效果和班布特罗对映体大多来自（-）-对映体[5-8]。，这是必要的为β2-激动剂对映体的分离和鉴定制定有效的分析方法的。 用环糊精衍生物和班布特罗对映体为瘦肉精个别决定的CE方法已经被报道[9-15]。但是，报告没有提及对映体分离的川丁特罗和马布特罗使用CE方法被发现，也没有任何方法报导同时对映体川丁特罗，马布特罗，克仑特罗，班布特罗进行分离分析。 本研究的目的是同时开发和验证对映体川丁特罗，马布特罗，克仑特罗，班布特罗对映体的环糊精介导的CE办法，并研究对映体的识别机制。 2实验 2.1仪器 所有CE实验使用高压-301HVPS毛细管电泳系统（Younite通微技术有限公司，通辽市，内蒙古，中国与真空紫外-22紫外检测器）固定在210 nm。外加电压为20kV。未涂层的熔融石英毛细管与总长度55cm（有效长度38cm）650流明的ID（永年光纤厂，河北，中国）被用来作为分离柱。使用前，毛细管用0.1mol氢氧化钠冲洗10分钟，去离子水5分钟，运行条件电解液为5分钟。彼此之间运行3分钟，这是处理运行电解液。进样应用在注射压力从一个高度差为10秒结束两端之间。 2.2化学品 雇用的所有试剂的制备分离缓冲区为分析纯。柠檬酸，二元磷酸钠（磷酸氢二钠），氢氧化钠（氯化钠），磷酸（磷酸）由天津博迪化工有限公司（中国天津）提供。 β-环糊精分析纯（β-CD的）购自上海化学试剂厂（中国上海）。羟丙基-β-CD（HP-β-CD的取代度（DS），平均一环糊精环取代约6.8），甲基-β-CD（ME-β-CD，副长约5.1），羟乙基-β-CD（-β-CD，副长约4.6），乙基-β-CD（ET-β-CD的DS约4.8）来自山东鑫达精细化工有限公司（中国山东）。蒸馏水从自动双面净化系统获得（上海鸭绒生化仪器厂上海，中国）。外消旋混合物和单一对映体在我们的实验室中合成了β2-激动剂（图1） 2.3电解质溶液的制备及分析物 运行缓冲液为100mm柠檬酸，磷酸氢二钠，10mm和120mmHP-β-CD，除非另有说明。缓冲液的pH值调整0.1MNaOH或0.1molMH3PO4解决方案。 消旋川丁特罗分析的混合溶液，马布特罗，克仑特罗，并与相应的班布特罗,浓度为208，200，102和216 μg/ml溶解适量准备甲醇的物质，并储存在4℃下。 所有的解决方案进行筛选，通过0.45μm膜过滤器和使用前脱气。 2.4计算 在CE分离参数计算公式如下： 表面迁移率： Μapp=lL/Vt （1） 分离因素： α=t2/t1