第六章微生物生长和环境条件.pptVIP

利用选择培养基分离 根据所要分离的菌种的特性选用培养基： ①分离真菌用马丁氏培养基，pH偏酸；分离放线菌用高氏1号，pH中性偏碱。 ②根据不同菌对化学试剂的敏感性：分离放线菌，培养基中加10%酚，抑制细菌、真菌；从土壤中分离真菌，加链霉素，抑制细菌生长。 ③根据分离对象的营养特征：分离能发酵纤维素的菌株，培养基以纤维素为唯一碳源。分离固氮菌，用无氮培养基。分离厌氧菌，可以消除培养基中的氧气 例如：在一细菌培养液中第一次测得的细菌数为 104 /ml，经过培养 4 h后，又测得菌液中的细菌数为 108 /ml，求此菌的世代时间和在此时间内繁殖的代数。 根据公式：G = （t2 - t1 ）/3.3 · lg (x2 /x1) t2 - t1 = （4 - 0）× 60 min = 240 min x2 = 108 x1 = 104 lg(x2 /x1 ) = lg108 - lg104 = 8 - 4 = 4 代入上式 G = 240/3.3 × 4 = 240/13.2 = 18 min 即在上述培养液中，世代时间为 18 min。 细菌繁殖代数 n = (t2 - t1)/G = 240/18 = 13.3 繁代。 同步培养法synchronous culture ：设法使培养的微生物处于比较一致的生长发育阶段上的培养方法。 同步生长（synchronous growth）的概念：一个细胞群体中各个细胞都在同一时间进行分裂的状态，称为同步生长，进行同步分裂的细胞称为同步细胞。 同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一相，彼此间形态、生化特征都很一致，因而是细胞学、生理学和生物化学等研究的良好材料。 由于一般微生物不能耐受高渗透压，所以日常生活中常用高浓度的盐或糖保存食物，如腌渍蔬菜、肉类及蜜饯等。糖的浓度通常为50-70%，盐的浓度为10-15%。 同步培养方法 选择法 诱导法 离心方法 过滤分离法 硝酸纤维素滤膜法 温度 培养基成份控制 光照和黑暗交替培养 获得同步生长的方法主要有两类： 环境条件诱导法：变换温度、光线、培养基等，造成与正常细胞周期不同的周期变化。 选择法：选择性过滤、梯度离心。物理方法，随机选择，不影响细胞代谢。 Helmstetter-Cummings 法 原理：一些细菌细胞会紧紧吸附于硝酸纤维微孔滤膜上。 步骤：菌悬液通过微孔滤膜，细胞吸附其上；反置滤膜，以新鲜培养液通过滤膜，洗掉浮游细胞；除去起始洗脱液后就可以得到刚刚分裂下来的新生细胞，即为同步培养。 细菌的同步生长和非同步生长 同步生长的时间，因菌种和条件而变化，由于同步群体的个体差异，同步生长不能无限地维持，往往会逐渐破坏，最多能维持2~3个世代，又逐渐转变为随机生长，即非同步化 三、 细胞的生长周期 原核细胞的生长周期一般较短，可分为DNA复制的准备前期（I），DNA复制期（R），细胞分裂期（D）。 真核细胞的生长周期 第三节 环境条件对微生物生长和代谢的影响 一 些 基 本 术 语 化疗(Chemotherapy) 灭菌(Sterilization) 防腐(Antisepsis) 消毒(Dis-infection) 化疗(chemotherapy) 是指利用具有选择性的化学物质如磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织或病变细胞进行治疗，以杀死组织内的病原微生物或病变细胞，但对机体本身无毒害作用的治疗措施。 灭菌（sterilization) 是指用物理或化学因子，杀灭物体中的所有活微生物，包括最耐热的细菌芽孢。 紫外线灭菌器 高压灭菌锅 手提式高压灭菌锅 防腐(antisepsis) 在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生长的一种措施，它能防止食品腐败或防止其它物质霉变。 消毒(disinfection) 消毒是指杀死或消除所有的病原微生物，可以起到防止感染或传播的作用。但不能杀死所有的芽孢。 消毒剂 一、 温度 最低生长温度 指微生物能进行繁殖的最低温度界限。 最适生长温度 指使微生物达到最大生长速度的温度。 最高生长温度 指微生物能生长繁殖的最高温度界限。 致死温度 指能在10分钟内杀死微生物的高温界限。 致死时间 在一定温度下杀死微生物所需要的最短时间。 极端嗜热菌 嗜热菌 中温菌 适冷菌 嗜冷菌 微生物生长的温度类型 -12 5 ~ -5 ~ 10 20 25~30 10 25 40 30 70 低温保藏菌种就是利用这个原理。 1）一些细