GB/T 18644-2002猪囊尾蚴病诊断技术.pdf

GB/r18644--2002 前 台 猪囊尾拗病(cysticercosiscellulosae)(俗称猪囊虫病)，是由寄生在人体小肠内的猪带绦虫(taenia solium)的幼虫(cysticercuscellulosae)所引起的，是一种危害严重的人兽互源性寄生虫病 世界动物卫 生组织[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE1将该病 列为B类疾病 目前，该病还广泛存在于发展中国家，不仅严重地影响着养猪业的发展，造成巨大的经 济损失，而且还威胁着人类身体健康，乃至生命。因此，1993年联合国卫生组织将该病列为需要根除的 六大疾病之一 猪囊尾坳病多不表现临床症状。目前，该病的检疫方法有舌检查法和免疫学检查法。前者仅适用于 舌上寄生(27%0 30写)的病猪。后者包括皮内变态反应、炭粒凝集试验、间接红细胞凝集试验、补体结合 反应、琼脂扩散试验、免疫电泳和酶联免疫吸附试验(ELISA)等等。其中，ELISA法具有高敏感性和特 异性，是最常用的一种方法。 本标准从病原分离、鉴定和血清学((ELISA方法)两方面规定了猪囊尾坳病检查方法，结果更为 h(靠 本标准规定的ELISA法，适用于感染猪的定性，最早可以检出感染9天的囊尾勤病猪。也适用于免 疫猪群抗体水平的评估。 本标准的附录A为标准的附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:吉林农业大学。 本标准主要起草人:韩宇、姜秀云、赵权。 中华人 民共和 国 国家标 准 猪囊尾蜘病诊断技术 GB/7门8644 2002 Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae 1 范围 本标准规定r猪囊尾坳病的病原分离与鉴定和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种诊断技术 本标准适用于猪囊尾坳病的诊断和流行病学调查以及检疫。 2 病原分离与鉴定 2.1 病原分离 2.1.1 样品采集 采集猪的咬肌、舌肌、内腰肌、隔肌、肋间肌、肩脚肌等，亦可采集脑、心脏、肝脏、肺脏等 2门.2 样品分离 成熟的猪囊尾坳为长椭圆形仁(6mm-10mm)X5mm]，半透明的囊壁内充满液体，上有一个黍粒 大小的白色小结节即为头节(scolex)和颈节(neck) 脑内寄生的则为圆球形郁mm-10mm 将上述任何部位的囊尾蝴，以手术刀和镊子剥离后，以生理盐水洗净，并用滤纸吸干 2.2 病原鉴定 2.2门 分离样品的压片制备 以剪刀剪开囊壁，取出完整的头节，再以滤纸吸干囊液后，将其置于两张载玻片之间并压片，于两张 载玻片问加人1-2滴生理盐水后置于显微镜下镜检 2.2.2 镜检 以低倍(物镜8倍、目镜5倍)观察囊尾蝴头节的完整性。 2.2-3 结果判定 低倍镜检，可见到头节的顶部有顶突，顶突上有内外两圈排列整齐的小钩，顶突的稍下方有四个均 等的圆盘状吸盘，即判为猪囊尾蝴 3 酶联免疫吸附试验(ELISA) 11 材料准备 3.1.1 器材 ELISA反应板、酶联免疫检测仪、加样器、洗瓶、10cmxlcm普通滤纸条等 3门.2 试剂 猪囊尾黝层析抗原、葡萄球菌A蛋白(SPA)辣根过氧化物酶(HRP)标记物(HRP-SPA),猪囊尾蝴 标准阴性和阳性全血滤纸片等 3门-3 被检猪全血血片 将 10cmx1cm普通滤纸条的一端标记被检猪号码，另一端吸取被检猪任何部位血液 1-2滴。于 室内阴干后，置于4C冰箱内(可保存6个月)。 3·1.4溶液配制 _ 中华人民共和国国家质且监督检验检疫总局2002-02-19批准 2002-05-D1实施 GB/T 18644一2002 溶液配制的方法见附录A(标准的附录) 3.2 操作方法 I2门 抗原包被 3.2.1.1 Ii先以抗原包被液(见附录A中All洗涤ELISA反应板各孔三次 3