HPpRSV抑制IFnβ表达及其调控机理的研究.docx

IUI IUI I ll Ul l U I I lU l II Y30531 48 资助项目 国家自然科学基金(编 万方数据 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 是否必威体育官网网址 绉 如需必威体育官网网址，解密时间 年 月 日 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果．尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：^互锰南 时间：砂l多年限月心日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，印学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版， 并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同e- 本人保留在其他媒体发表论文的权力． 注：必威体育官网网址学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交必威体育官网网址的论 文)在解密后适用于本授权书． 学位论文作者张1互锰相 导师始袈涉元 签名日期：矽【S年Iz月f S日 签名日期： z。，j啤，，月，厂日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 万方数据 HP．PRRSV抑制IFN一13表达及其调控机理的研究目 HP．PRRSV抑制IFN一13表达及其调控机理的研究 目 录 摘要 ．i Abstract．．．．． ．．．．．． ．．．．．．．．．．．． ．．．．．．． ．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．iv 缩略词表(Abbreviation) ．vi 1前言1日U吾 ．．1．．1 1．1研究问题的由来 1 1．2文献综述 1 1．2．1从猪繁殖与呼吸综合征到高致病性猪繁殖与呼吸综合征的衍变 l 1．2．2猪繁殖与呼吸综合征病毒的蛋白和结构特征 3 1．2．3猪繁殖与呼吸综合征病毒的致病机制研究 ．． ．6 1．2．4宿主对猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫应答 9 I．2．5猪繁殖与呼吸综合征病毒感染相关的受体基因及其功能 ．．12 1．2．6 I型干扰素对PRRSV的免疫应答反应 ．19 1．2．7干扰素调节因子3对IFN．p表达的调控作用 ．20 1．2．8 PRRSV对I型干扰素表达的抑制作用 ．20 1．3试验目的 ．22 2试验材料和方法 24 2．1本研究的技术路线 ．．24 2．2研究HP—PRRSV调控IFN-f3表达机制的试验材料和方法 24 2．2．1细胞和病毒 24 2．2．2工具酶及主要试剂 25 2．2．3培养基的配置 26 2．2．4缓冲液的配置 27 2．2．5主要仪器设备 29 2．2．6实验分组和样本采集 29 2．2．7试验方法 30 2．2．8统计分析方法 35 2．3有关PRRSV受体的感染风险分析的试验材料和方法 ．36 2-3．1样本采集 36 2．3．2试验方法 36 万方数据 华中农业大学2015届博士研究学位(毕业)论文2．3．3统计分析方法 华中农业大学2015届博士研究学位(毕业)论文 2．3．3统计分析方法 一40 3试验结果 4l 3．1 HP．PRRSV感染抑制IFN．p的表达 4l 3．1．1 HP．PRRSV感染抑制MARC．145细胞IFN．D的mRNA表达 41 3．1．2 HP—PRRSV感染抑制MARC，145细胞中的IFN．p的蛋白表达 ．42 3．1．3 HP．PRRSV感染抑制PAM细胞中的IFN．p的mRNA和蛋白表达 43 3．2 HP．PRRSV感染抑制IFN．D的表达的调控机理 45 3．2．1感染HP．PRRSV的MARC一145细胞中的IRF3的mRNA表达情况 45 3．2．2感染HP．PRRSV的MARC．145细胞的IRF3的总蛋白表达水平 ．46 3．2．3感染HP．PRRSV的PAM细胞IRF3的mRNA和总蛋白表达特征 48 3．2．4 HP．PRRSV抑制MARC．145细胞IRF3蛋白的细胞核转位 49 3．2．5 HP．PRRSV抑制MARC．145细胞IRF3蛋白的磷酸化 ．．51 3．2．6 HP．PRRSV抑制PAM