HSP90抑制剂对白念珠刺激巨噬细胞分泌IL-23的研究.docx

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HSP90抑制剂对白念珠刺激巨噬细胞分泌IL-23的研究

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则,承担相应法律责任。 ,:0’ ㈡÷’≯》 歹?,警‘‘ 誓..≮ 研究生签名:乏肫乞≥导师签章:位漩级学院领导霉釜:≯。。.一尊.f谲 ∥‘o 一,。’≮ ,麓; 歹 Ⅻi生军j3 R工1B、:夕 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:至书仁 导师签章: 幻,r年弓月刁日 万方数据 目 目 录 中文摘要 l 英文摘要 5 英文缩写 1 0 研究论文HSpoe*‰歹rlJ用口.凸森:■琳巨噬细胞分泌IL.23的研究 前言号j占 ” 一 ””一””一 “ ”一·· ” ” ”” li 1i 材料与方法 o o 一 12 结果 · ····· ··· ··· ··· ······1 8 附图 20 附表 26 讨论“ 一”·· ····· .. “ 一一” 一..” ·27 结{念 ·· · ·· ·· ·· ·· ····32 参考文献 32 综述 IL.23在真菌感染中作用的研究进展 38 致谢· ··· ···· ····· ···· · 46 个人简历 47 万方数据 中文摘要HSPgO抑制剂对白念珠菌刺激巨噬细胞分泌l 中文摘要 HSPgO抑制剂对白念珠菌刺激巨噬细胞分泌l L-23的研究 摘 要 目的:白念珠菌是引起人类真菌感染的主要致病菌,在医院获得性 感染中居第四位,死亡率接近50%,它常寄生在人类的口腔、下呼吸道、 胃肠道和泌尿生殖道中,可引起口腔泌尿生殖道等的表浅感染,也可通 过血行播散和器官入侵引起免疫力低下病人致命的系统性感染,患者出 现念珠菌血症、心内膜炎,中枢神经系统感染、眼内炎和骨髓炎,造成 多器官功能的损害甚至死亡。在系统性白念珠菌感染过程中,强烈的炎 症反应不仅对机体没有有利作用,反而对机体器官组织造成损伤。IL.23 参与机体防御白念珠菌感染的天然免疫过程,IL。23产生后可刺激巨噬细 胞产生更多的促炎因子,并可作用于Thl7细胞,激活获得性免疫反应, 进一步增强机体清除白念珠菌的能力,IL一23对T1117细胞的生存、增殖、 再激活及产生IL.1 7是不可缺少的。。因此,IL.23是连接天然免疫和获得 性免疫的桥梁。Hsp90是一个进化保守、含量十分丰富的分子伴侣,不仅 参与应激反应,还参与了炎症反应和天然免疫反应过程,它影响着大量 客户蛋白的活性和信号通路的传导。本实验通过巨噬细胞与白念珠菌体 外相互作用,探讨巨噬细胞与白念珠菌体外相互作用后IL.23的表达分泌 水平及Hsp90抑制剂对IL.23表达分泌水平的影响。 方法: 1 实验用小鼠 昆明种健康小鼠30只,雌性,清洁级,4—5周龄,1 5~209,由河 北医科大学实验动物中心提供,合格证编号:1404078。 2实验用菌株 白念珠菌标准株ATCC 90028购于中国医学科学院微生物研究所。 3菌株的活化和菌悬液的配制 白念珠菌标准株复温后在沙氏培养基上活化三次,加入含0.1%吐温 80的1640培养液,吸管吹打混匀,用血球计数板计数,调整终浓度至 1.2x106/mE。 4 巨噬细胞分离培养及鉴定 万方数据 中文摘要小鼠腹腔巨噬细胞分离法提取巨噬细胞,显微镜下计数,并用含10%胎 中文摘要 小鼠腹腔巨噬细胞分离法提取巨噬细胞,显微镜下计数,并用含10%胎 牛血清的1640培养液进行培养,巨噬细胞培养3天后取出。 巨噬细胞的鉴定采用形态学及免疫组化SP法:取出的巨噬细胞PBS 洗涤3遍,丙酮固定,常规HE染色、瑞士一吉姆萨染色及免疫组织化学 SP法检测巨噬细胞CD68抗原的表达,中性树胶封固

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