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HSP90抑制剂对白念珠刺激巨噬细胞分泌IL-23的研究
河北医科大学
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研究生签名:至书仁 导师签章:
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目 录
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研究论文HSpoe*‰歹rlJ用口.凸森:■琳巨噬细胞分泌IL.23的研究 前言号j占 ” 一 ””一””一 “ ”一·· ” ” ”” li 1i 材料与方法 o o 一 12
结果 · ····· ··· ··· ··· ······1 8
附图 20
附表 26
讨论“ 一”·· ····· .. “ 一一” 一..” ·27 结{念 ·· · ·· ·· ·· ·· ····32 参考文献 32
综述 IL.23在真菌感染中作用的研究进展 38
致谢· ··· ···· ····· ···· · 46
个人简历 47
万方数据
中文摘要HSPgO抑制剂对白念珠菌刺激巨噬细胞分泌l
中文摘要
HSPgO抑制剂对白念珠菌刺激巨噬细胞分泌l L-23的研究
摘 要
目的:白念珠菌是引起人类真菌感染的主要致病菌,在医院获得性 感染中居第四位,死亡率接近50%,它常寄生在人类的口腔、下呼吸道、 胃肠道和泌尿生殖道中,可引起口腔泌尿生殖道等的表浅感染,也可通 过血行播散和器官入侵引起免疫力低下病人致命的系统性感染,患者出 现念珠菌血症、心内膜炎,中枢神经系统感染、眼内炎和骨髓炎,造成 多器官功能的损害甚至死亡。在系统性白念珠菌感染过程中,强烈的炎 症反应不仅对机体没有有利作用,反而对机体器官组织造成损伤。IL.23 参与机体防御白念珠菌感染的天然免疫过程,IL。23产生后可刺激巨噬细 胞产生更多的促炎因子,并可作用于Thl7细胞,激活获得性免疫反应, 进一步增强机体清除白念珠菌的能力,IL一23对T1117细胞的生存、增殖、 再激活及产生IL.1 7是不可缺少的。。因此,IL.23是连接天然免疫和获得
性免疫的桥梁。Hsp90是一个进化保守、含量十分丰富的分子伴侣,不仅 参与应激反应,还参与了炎症反应和天然免疫反应过程,它影响着大量 客户蛋白的活性和信号通路的传导。本实验通过巨噬细胞与白念珠菌体 外相互作用,探讨巨噬细胞与白念珠菌体外相互作用后IL.23的表达分泌 水平及Hsp90抑制剂对IL.23表达分泌水平的影响。
方法:
1 实验用小鼠 昆明种健康小鼠30只,雌性,清洁级,4—5周龄,1 5~209,由河
北医科大学实验动物中心提供,合格证编号:1404078。 2实验用菌株
白念珠菌标准株ATCC 90028购于中国医学科学院微生物研究所。 3菌株的活化和菌悬液的配制 白念珠菌标准株复温后在沙氏培养基上活化三次,加入含0.1%吐温
80的1640培养液,吸管吹打混匀,用血球计数板计数,调整终浓度至
1.2x106/mE。
4 巨噬细胞分离培养及鉴定
万方数据
中文摘要小鼠腹腔巨噬细胞分离法提取巨噬细胞,显微镜下计数,并用含10%胎
中文摘要
小鼠腹腔巨噬细胞分离法提取巨噬细胞,显微镜下计数,并用含10%胎 牛血清的1640培养液进行培养,巨噬细胞培养3天后取出。
巨噬细胞的鉴定采用形态学及免疫组化SP法:取出的巨噬细胞PBS 洗涤3遍,丙酮固定,常规HE染色、瑞士一吉姆萨染色及免疫组织化学 SP法检测巨噬细胞CD68抗原的表达,中性树胶封固
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