CqGABARAP在对虾白斑综合征病感染中的功能研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》 等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门或其指定机构送交学位 论文(包括纸质版和电子版)，允许学位论文进入厦门大学图书馆及 其数据库被查阅、借阅。本人同意厦f-IX学将学位论文加入全国博士、 硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇 编出版，采用影印、缩印或者其他方式合理复制学位论文。 本学位论文属于： ( )1．经厦门大学必威体育官网网址委员会审查核定的必威体育官网网址学位论文， 于 年 月 日解密，解密后适用上述授权。 ／ ( v／)2．不必威体育官网网址，适用上述授权。 (请在以上相应括号内打“√”或填上相应内容。必威体育官网网址学位论文应是 已经厦门大学必威体育官网网址委员会审定过的学位论文，未经厦门大学必威体育官网网址委员 会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公 开学位论文，均适用上述授权。) 声明人(签名)．侍伽 伊f6年多月7日 万方数据 目录目录 目录 目录 缩略词中英文对照表 I 摘要 III Abstract ．．V 第1章绪论 1 1．1白斑综合征病毒研究概况 ．1 1．1．1白斑综合征病毒的发现和形态结构 ．．1 1．1．2白斑综合征病毒的感染宿主和感染动物模型 ．．1 1．1．3白斑综合征病毒的分子生物学研究 ．．3 1．1．4白斑综合征病毒的防治措施 ．．7 1．2细胞自噬 ．8 1．2．1细胞自噬及其信号转导 一8 1．2．2细胞自噬与病毒感染 10 1．2．3 At98家族成员GABARAP研究进展 10 1．3 Rho家族蛋白 11 1．3．1 Rho家族成员与功能 ．11 1．3．2 Racl在病毒感染中的研究进展 13 1．4本研究的内容、目的和意义 14 1．4．1技术路线 14 1．4．2研究目的和意义 14 第2章自噬相关蛋白Cq．Q蛆ARAP与WSSV感染关系研究 16 2．1材料 。 ．．1 6 2．1．1实验动物及病毒 16 2．1．2引物 ．1 6 2．1．3主要试剂 1 7 万方数据 目录2 目录 2．1．4主要实验仪器 1 8 2．1．5主要溶液配制 19 2．2方法 20 2．2．1 Hpt细胞培养 ．．20 2．2．2亚细胞蛋白组分分离 21 2．2．3细胞免疫荧光检测 22 2．2．4 Hpt细胞RNA干扰 22 2．2．5 RNA提取及eDNA合成 24 2．2．6 Real．time RCR检测 25 2．2．7 Westem blot检测 26 2．2．8抗体转染 27 2．3结果 27 2．3．1 Cq-GABARAP在细胞内的定位及其与WSSV感染 ．27 2．3．2 Cq-GABARAP基因敲降与WSSV感染 ．29 2．3．3 Cq-GABARAP抗体封阻与WSSV感染 ．3 1 2．3．4 Cq—GABARAP重组蛋白与WSSV感染 ．32 2．4讨论 34 第3章红螯螯虾P13K．Akt信号通路与WSSV感染关系研究 ．37 3．1材料 37 3．1．1实验动物及病毒 37 3．1．2引物 一37 3．1．3主要试剂 38 3．1．4主要实验仪器 38 3．1．5主要溶液配制 39 3．2方法 39 3．2．1基因克隆 39 3．2．2组织样品的采取 41 3．2．3 RNA提取及eDNA合成 42 万方数据 目录3 目录 3．2．4 Real．time PCR检测 42 3．2．5 Western blot检测 一42 3．2．6化学抑制剂处理细胞 ．42 3．3结果 42 3．3．1 Cq．P13Kc“6基因克隆 ．42 3．3．2 Cq．P13K基因组织分布 ．48 3．3．3 P13K inhibitor抑制Cq．P13K影响WSSV入胞 49 3．3．4 Cq．Akt基因克隆 49 3．3．5 Akt inhibitor抑制Cq．Akt影响WSSV入胞 54 3．4讨论 54 第4章红螫螯虾GABARAP．Racl通路介导的WSSV入胞调控 57 4．1材料 57 4．1．1实验动物及病毒 57 4．1．2引物 57 4．1．3主要试剂 58 4．1．4主要实验仪器 59 4．1．5主要溶液配制 59 4．2方法 59 4．2．1基因克隆 59 4．2．2组织样品的采取 6l 4．2．3 RNA提取及cDNA合成 6l 4．2．4 Real．time PCR检测 一6 1 4．2．5 Hpt细胞RNA干扰 6 1 4．2．6 Westem blot检测 62 4．2．7化学抑制剂处理细胞 62 4．2．8蛋白原核表达 62 4．2．9蛋白质谱鉴定 64 4