ILK αSMA在糖尿病大鼠肾组织的表达及苯那普利对其影响研究.docx

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ILK αSMA在糖尿病大鼠肾组织的表达及苯那普利对其影响研究

河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 承担相应的法律责任。 研究生弥;与诊导师躲冀学院领导簪彩玲 沙辟3月2 7日r‘ 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生躲冯首翩虢雾 ‘ ∥.P年3月叼El , 中文摘要 ILK、铲SMA在糖尿病大鼠肾组织的表达 及苯那普利对其影响的研究 摘 要 目的:随着人民生活水平的不断改善和人口的老龄化, 我国糖尿病(diabetes mellitus,DM)的发病率逐年升高,糖尿 病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者也随之增加。DN是DM 常见而严重的慢性微血管并发症,已成为终末期肾衰竭(end stage renal failure,ESRF)的主要原因之一,死亡率逐渐上升。 因此,探索DN的发病机制及有效的防治措施是当今倍受肾 病学者关注的课题。近年来研究表明DN肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,砌F)是DN进展至终末期肾病的重要病理 基础,且RIF与DN患者肾功能损害及预后密切相关。RIF 以肾小管上皮细胞损伤和细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的过度堆积为主要特征。研究发现,肾小管上皮细胞 转分化(epithelial myofibroblast transdifferentiation,EMT)在 RIF过程中发挥重要作用。 整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILl0是近年发现 的一种多功能蛋白激酶,参与多种信号传导通路,在调节细 胞粘附、基质积聚等过程中起重要作用。研究表明ILK在 TGF.13。/Smad信号通路介导的EMT过程中起关键作用:ILK 的过度表达直接或间接促进肾小管上皮细胞间黏附消失、诱 导Q.平滑肌肌动蛋白(伐.smooth muscle actin,伐.SMA)的表达 和肌动蛋白的重组、引起肾小管基底膜的裂解、增加细胞的 迁移和浸润等。a.SMA是一种细胞骨架蛋白,在正常肾脏中 中文摘要 仅见于平滑肌源性细胞,除血管外仅有微弱、局灶的表达, 但在EMT的过程中某些间质细胞被激活后可表达a.SMA, 异化为肌成纤维细胞(myofibroblast,MyoF),MyoF是一种超 微结构介于平滑肌细胞和成纤维细胞之间的特殊类型的细 胞,具有活跃的增殖和分泌胶原的能力,是ECM的主要来 源,在肾组织肥大、增生及纤维化过程中起重要作用,因此, cc.SMA被认为是EMT的主要标志之一。在DN肾小管上皮 细胞损伤分泌的各种因子中,转化生长因子B1(transformin growth factor-p1,TGF.p1)是最重要的促纤维化因子,它可以 通过直接刺激ECM的过度堆积,抑制ECM降解而促进RIF; 也可以通过调节其他细胞因子诱导肾固有细胞分泌大量 ECM,在DN肾小管间质损伤及纤维化中发挥重要作用。 研究表明,血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor,ACEI),如苯那普幂JJ(benazepril) 对DN具有明确的肾脏保护作用,其可以阻断血管紧张素II (AngII)的生成,抑制其功能,而阻断其作用,可以减轻DN 肾小管间质损伤及纤维化,但是否能下调ILK及仅.SMA在 肾组织的表达,国内外研究较少,目前尚未见报道。 本课题拟通过链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导建立 糖尿病大鼠模型,采用免疫组化和RT-PCR两种检测方法, 测定糖尿病大鼠肾间质ILK、Ot.SMA、TGF.p1的表达与变化 情况及其与肾脏病变发生、发展之间的关系,同时应用苯那 普利对糖尿病大鼠模型进行干预,从而进一步探讨此药物对 糖尿病大鼠肾脏保护的作用机理,为阐明DN的发病机制及 寻找防治方法提供实验性理论依据。 方法:选择清洁级健康雄性SD大鼠45只(体重180~ 中文摘要 2009),随机抽取30只腹腔注射STZ(溶于O.1mol/L柠檬酸缓 冲液,浓度为2%,pH值为4.5,注射剂量为60mg/kg)带O备 糖尿病大鼠模型,剩余15只仅注射相当体积的柠檬酸

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