- 1、本文档共86页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
JAKSTAT途对BmNPV的感染应答及家蚕作为痛风药物筛选动物模型的研究
苏州大学学位论文使用授权声明
本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定, 即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸 质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献 信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、 中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子 文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索。
涉密论文口 本学位论文属
非涉密论划在——年一月解密后适用本规定。
论文作者签名:笪i醺堕7k气——一 Et 期:翌尘_._!垒
导师签名:二蚕:盛日 期:型!兰p
国家重点基础研究 国家自然科学基金
JAK.STAT途径在哺乳类免疫应答中起中心作用,其活性丧失导致B.细胞和 T.细胞功能缺陷,引起严重的免疫缺陷。昆虫的JAK.STAT信号途径在果蝇中首 先被发现,STAT基因在果蝇以及草地夜蛾Sf9细胞中都存在长型和短型两种剪接 体。在前期的研究中已克隆了开放读码框(ORF)的为2202nt的一种Bm.STAT的 eDNA(命名为短型BmSTAT,BmSTAT.S),在电子克隆的基础上,通过RT-PCR 成功克隆了BmSTAT的另一剪接型(命名为长型BmSTAT,BmSTAT.L),证明 BmSTAT基因的确存在选择性拼接。测序结果显示Bm.STAT.L的ORF为2313 nt, 编码770aa;通过对已有的基因组序列拼接和Gap填补,获得了BmSTAT的ORF 所对应的基因组序YUC28777bp),内含子、外显子分析显示,BmSTAT有20个外显 子,BmSTAT-S由1.19外显子拼接而成,BmSTAT-L由1.18外显子和20外显子 拼接而成。除了第11个内含子边界是GC.AG外,其它内含子的边界遵循GT-AG 原则。
为了进一步探讨家蚕JAK.STAT途径抗病毒感染的免疫应答,我们通过非转座 子介导将家蚕信号转导子及转录激活因子(STAT)基因表达盒(BmSTAT)导入家 蚕BmN培养细胞,经抗生素Zeocin筛选获得过表达BmSTAT的稳定转化细胞。线性 化病毒Bm.BacPAK6感染结果显示:病毒感染后转化BmN细胞和正常BmN细胞的
BmSTA瑾因表达水平分别提高T32.70%和14.63%,表明家蚕JAK.STAT途径对杆
状病毒感染有应答。比较转化BmN细胞和正常BmN细胞对杆状病毒感染的抵抗性, 发现转化BmN细胞的病毒感染细胞比例低于正常BmN细胞,二者之间的感染率相
中文摘要 JAK/STAT途径对BmNPV的感染应答及家蚕作为通风药物筛选动物模型的研究
差8.28%,18.02%;在感染病毒的转化细胞中,伊半乳糖苷酶基因的表达水平比病 毒感染正常细胞的略低,推测这与转化细胞中BmS仉盯的水平(JAK.STAT途径信号) 高于正常细胞有关。然而,在BmN培养细胞中,BmSTA瑾因的过表达尚不足以明 显提高培养细胞的抗病毒感染。研究结果为进一步探讨家蚕JAK.STAT途径在病毒
感染应答方面的作用奠定了基础。 此外,为了进一步探讨过表STAT对家蚕的影响,我们将转基因载体.
plZT.STAT通过精子介导法导入蚕卵,蚕卵孵化后正常饲养。通过GFP筛选在 GO代获得呈绿色荧光的家蚕,用gfp特异性引物可以从荧光蚕的基因组中扩增出 0.7kb的特异性条带,初步结果显示所获得的荧光蚕为转基因家蚕。
2.家蚕作为痛风药物筛选动物模型 痛风是由于尿酸单钠结晶在关节处堆积造成的一种疾病。血淋巴中尿酸含量
过高通常能够导致痛风性关节炎、结节瘤的形成、高尿酸症、尿酸肾结石及肾脏
疾病等疾病的发生。在过去的几十年中,人们一直利用小鼠作为哺乳动物模型来 筛治疗高尿酸及痛风的药物,然而,作为痛风药物筛选的模式动物,小鼠存在一 系列的问题:高成本,生物危害,伦理冲突等,最为重要的是小鼠体内的尿酸代 谢机制与人体不同。因此迫切期望找到另外一种替代动物作为筛选和评估痛风药 物的动物模型。在本研究中,我们以家蚕作为动物模型对痛风药物在降低家蚕体 内尿酸含量及抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)方面的效果进行了评估。结果表明,通 过口服给药的方式,对人类痛风病有治疗效果的药物在家蚕体内也能够同样发挥 其作用。与对照组家蚕相比,别嘌醇能够有效降低治疗组家蚕体内的XOD活力, 且有剂量依存性。与此相反,小苏打则没有降低XOD活力的作用。在连续给药(25 mg/ml/d别嘌醇或25 mg/ml/d小苏打)6天之后,口服别嘌醇的治疗组家蚕血淋巴 和脂肪体内的尿酸含量降低约90%.95%(P0.01),口服小苏打的治疗组家蚕血
您可能关注的文档
- IL33在痛风中的作及其机制.docx
- IL35基因转染小鼠骨髓间充质干细对小鼠免疫功能的研究.docx
- IL4和IL12在宫颈癌及癌病变中的表达及对紫杉醇过敏的影响.docx
- IL33通过ST2RK12MSK1信号通路促进哮喘气道重塑机制的研究.docx
- IL34调控FLS在RA发病制中的作用研究.docx
- iLBC语算法研究及DSP实现-通信与信息系统专业毕业论文.docx
- IL8基因真核表达载体的构建及其对OVCAR3细胞生学机制的分析.docx
- il[涵洞、渡槽、倒虹吸管模板及支(拱)架工程检验批质量验收记录表.doc
- IL8介导血平滑肌细胞迁移机制及G31P的作用初探.docx
- IL9在小鼠银屑病皮损的表达及其抗体对IL17 CCR的影响研究.docx
文档评论(0)