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LHRH-TAT-壳聚糖siRNA复合物与巨噬细胞的相互作用以及TPP-LHRH-MPG△NLSAFP-siRN复合物对肿瘤生长的影响
学校代码:
学校代码: 10023
学 号:$2012015002
硕士学位论文
LHRH.TAT.壳聚糖/siRNA复合物与巨噬细胞的相互 作用以及TPP.LHRH.MPG△NLs/AFP.siRNA复合物 对肿瘤生长的影响
所 院 生物医学工程研究所 姓 名 邵楠
指导教师: 冷希岗研究员 导师小组: 董霞刘兰霞朱敦皖 学科专业: 生物医学工程 研究方向: 肿瘤靶向纳米技术 完成日期: 201 5年5月
万方数据
独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的
独创性声明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人已经发表或 撰写过的研究成果,也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并 表示谢意。
学位论文作者签名:研桷 签字吼 沙,步年/月多日
学位论文版权使用授权书
本学位论文作者完全了解j壁塞迹塑医堂院有关保存、使用学位论文的 管理办法。有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论 文被查阅和借阅。本人授权j匕塞坯塑医堂隍可以将学位论文的全部或部分内容 编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学 位论文。
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靴敝储獬:印嗣 导师签名:
签字日期:弘,f年多月$日 签字日期: 年 月 日
学位论文作者毕业后去向:
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万方数据
目录摘要
目录
摘要 .1
Abstracts .... ...... . ... ..... ..... ...3
第一章绪论 5
1.RNA干扰的发展 5
2.RNA干扰的作用机制 6
3.RNA干扰的应用 8
3.1 RNA干扰在基因功能研究中的应用 .8
3.2 RNA干扰在植物抗病毒研究中的应用 .8
3.3 RNA干扰在临床治疗中的应用 .9
4.提高RNA干扰效率的策略及非病毒载体的开发 .1 1
4.1 siRNA的化学修饰 1 1
4.2 RNA的体内运输及相关非病毒载体 。12
5.负载基因的纳米复合体进行基因转染的障碍 14
5.1纳米复合体与免疫系统的相互作用 一14
5.2纳米复合体与细胞的相互作用 15
6.TPP对非病毒载体的修饰 ..17
7.课题的提出 17
第二章LHRH.TAT.壳聚糖/siRNA纳米复合物与免疫系统的相互作用 19
1.试剂与仪器 19
1.1实验材料 19
1.2实验仪器 一20
1-3试剂配制 一20
2.实验步骤 2l
万方数据
2.1纳米复合物的制备
2.1纳米复合物的制备 2l
2.2凝胶阻滞实验 2l
2.3纳米复合物表征 22
2.4细胞因子的测定 22
2.5 巨噬细胞吞噬实验 23
2.6巨噬细胞对纳米复合物的摄取 24
2.7统计学方法 24
3. 实验结果 ..25
3.1纳米复合物的表征 25
3.2纳米复合物对细胞因子释放的影响 26
3.3纳米复合物对小鼠体内巨噬细胞活性的影响 28
3.4纳米复合物体外对巨噬细胞活性的影响 28
4.讨论 29
第三章TPP修饰LHRH-MPG△NL8对肿瘤细胞生长的影响 30
1.试剂与仪器 30
1.1实验材料 ..30
1.2实验设备 一30
1.3试剂配制 一3 1
实验步骤 .3 1
2.1 TPP修饰LHRH.MPG△NL5的表征 3 1
2.2 TPP.LHRH.MPG△NL5/AFP.siRNA对肿瘤细胞生长的影响 一32
2.3 TPP.LHRH.MPG△NL8/AFP.siRNA对靶基因的抑制作用 一32
3.实验结果 34
3.1 TPP.LHRH.MPG△NL8/siRNA的表征 34
3.2 TPP.LHRH.MPGANL8/AFP.siRNA对肿瘤的抑制效率 35
万方数据
3.3
3.3 TPP.LHRH.MPG△NL8/AFP.siRNA对目的基因的抑制效率 37
4.讨论 39
总结与展望 .41
参考文献 .43
致{射 ..50
附蜀乏 ..5 1
万方数据
北京协和医学院硕士毕业论文摘要
北京协和医学院硕士毕业论文
摘要
RNA干扰(RNA interference,I斟Ai)是普遍存在于真核生物体内的一种能 够对特定的mRNA序列进行降解的转录后调控机制。在包括肝癌在内的多种癌 症疾病的治疗研究中具有良好的应用前景。然而,由于RNA本身具有的易降解、
不易穿过细胞膜等特点,为RNAi的临床应用制造了很大的阻碍。新型基因载体 能够提高RNA的递送效率,但其生物相容性、RNA释放以及对RNAi效率的影 响需要更加深入的评估
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