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miR-203a和miR-20b基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其甲基化状态分析
河北医科大学
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目 录
中文摘要 1
英文摘要 5
英文缩写 9
研究论文miR。203a和miR-203b基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其甲 基化状态分析
前言日IJ舌 ..10一..1
材料与方法 ..11
结果 ..21
附图 ..23
附表 ..27
讨论 ..33
结论 ..36
参考文献 ..36
综述miR。203a在肿瘤中的研究进展 40
致谢 ..51
个人简历 ..52
万方数据
中文摘要miR-203a和miR-203b基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其甲
中文摘要
miR-203a和miR-203b基因在食管鳞状细胞癌中的表达及其甲
基化状态分析
摘 要
目的:食管癌是发生在食管粘膜上皮的恶性肿瘤,根据食管癌的组织 学特点可分为五种类型,其中食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)在食管癌中所占比例最多,大约占90%,食管腺癌
(esophageal adenocarcinoma,EA)次之,占7%左右,其他几种类型均少 见。我国是世界上食管癌发生率和病死率均较高的国家之一,同时食管癌 预后特别差,晚期患者生存率极低。然而到目前为止,食管癌的发病机制 尚不清楚。
近年来对食管癌的发病机制已进行广泛研究,其中对表观遗传学的改 变特别是miRNAs启动子区高甲基化己成为研究的热点,本研究通过检测 miR.203a和miR.203b基因在食管癌细胞和食管鳞癌组织中的表达及其甲 基化状态,探讨miR.203a和miR.203b基因甲基化与食管癌发生、发展的 关系,从而为食管癌发病的分子机制、治疗方案及其评估预后等方面提供 新的理论依据。
方法:
1应用实时定量RT.PCR(Quantitative real.time RT.PCR,qRT.PCR) 方法检测应用DNA甲基化转移酶抑制剂5.氮杂.2’.脱氧胞苷 (5-aza.2’deoxycitydine,5-aza.dC)处理前后的食管癌细胞系(TEl、TEl3、
YES.2、ECal09和T.TN)和54例食管鳞癌组织及其相应的癌旁组织中
miR.203a和miR.203b基因的表达。 2应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain
reaction,MSP)方法检测应用5-aza-dC处理前后的食管癌细胞系和83例
食管鳞癌组织及其相应的癌旁组织中miR-203a和miR-203b基因的甲基化 状态。
3运用统计软件SPSSl9.0对数据进行统计学分析。 结果:
1 miR.203a基因在食管癌中的表达及甲基化
万方数据
中文摘要1.1食管癌细胞系中miR.203a基因的表达及甲基化状态
中文摘要
1.1食管癌细胞系中miR.203a基因的表达及甲基化状态
未经5-aza.dC处理,五种食管癌细胞中miR.203a基因的表达均相对 较低,且呈高甲基化状态;5-aza.dC处理后,miR.203a基因的表达均显 著升高(均P0.05),YES.2细胞中miR.203基因甲基化程度显著降低, 其余4种食管癌细胞系中miR.203a基因为非甲基化状态。 1.2食管癌组织中miR.203a基因的表达
miR.203a基因在食管癌和其相应的癌旁组织的表达量分别为 0.253+0.099和0.48 1+0.1 89,食管癌组织miR.203a基因的表达量明显低 于其相应的癌旁组织,两者的差异有统计学意义(t--.14.137,P=0.000)。 在食管鳞癌患者中,miR.203a的表达与肿瘤组织的肿瘤分期和分化程度 有关(PO.05),而与患者的年龄、性别和淋巴结转移无关(尸O.05)。 1.3食管癌组织中miR.203a基因甲基化状态的研究
miR.203a基因启动子区在食管鳞癌组织和其相应的癌旁组织的甲基 化率分别62.7%(52/8
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