HDAC抑制剂苯丁酸钠对离体和在小胶质细胞活化的抑制作用-神经生物学专业毕业论文.docx

大连医科大学硕士学位论文目 大连医科大学硕士学位论文 目 录 一、摘要 。1 (一)中文摘要 ．．1 (二)英文摘要 ．．4 二、正文 8 (一)前言(一)日U舌 ．．88 (二)实验材料 ．1 0 1．实验动物 ．．10 2．药品与试剂 一11 3．抗体 ．．1 1 4．实验所需液体 ．．11 5．主要实验仪器 13 (三)实验方法 ．13 1．药物配置和使用 ．．13 2．细胞培养 ．．14 ：；．Griess．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 1； 4．MTT．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 1； 5．免疫细胞荧光化学 ．．15 6．免疫组织化学 ．．16 7．蛋白质免疫印迹 ．．17 8．RT-PCR．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．】8 万方数据 大连医科大学硕士学位论文9．实验数据的处理 大连医科大学硕士学位论文 9．实验数据的处理 18 (四)实验结果 ．19 1．苯丁酸钠对LPS活化的原代小胶质细胞NO产生的影响 ．19 2．苯丁酸钠对LPS活化的原代小胶质细胞生存能力的影响 ．20 3．苯丁酸钠对LPS活化的原代混合胶质细胞体系Cd,胶质细胞 形态的影响 ．．22 4．苯丁酸钠对LPS活化原代混合胶质细胞体系中Iba．1表达的影 响 ．．23 5．苯丁酸钠对LPS急性炎症模型小鼠脑内小胶质细胞形态和数 目的影响 24 6．苯丁酸钠对LPS急性炎症模型小鼠脑内Iba．1蛋白表达的影响 ：：6 7．苯丁酸钠对LPS急性炎症模型小鼠脑内炎症因子表达的影响 26 8．苯丁酸钠对LPS急性炎症模型小鼠脑内细胞凋亡的影响 ．27 9．苯丁酸钠对LPS慢性炎症模型小鼠脑内小胶质细胞形态的影 响 ．．28 10．苯丁酸钠对LPS慢性炎症模型小鼠脑内Iba．1蛋白表达的影 响 ．．29 11．苯丁酸钠对LPS急性炎症模型小鼠脑内炎症因子表达的影响 ．．．．．．．．．．．．． ．．．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．． ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． ．．．．．．．．．．3() 万方数据 大连医科大学硕士学位论文(五)讨论 大连医科大学硕士学位论文 (五)讨论 32 三、结论 35 四、参考文献 。36 五、综述 。42 (一)综述 42 (二)参考文献 ．48 六、致谢 ．52 万方数据 大连医科大学硕士学位论文HDAC抑制剂苯丁酸钠对离体和在体小胶质细胞活化的 大连医科大学硕士学位论文 HDAC抑制剂苯丁酸钠对离体和在体小胶质细胞活化的 抑制作用 硕士生姓名：汪颖 指导教师：吴雪飞副教授 指导小组：李韶教授 赵杰教授 专业名称：神经生物学 摘 要 目的： 随着社会不断发展，人口老龄化不断加剧，阿尔茨海默病，帕金森病和多发 性硬化等神经退行性疾病成为一个社会性的难题。目前尚没有有效的手段预防或 治疗这些慢性疾病。脑内小胶质细胞的活化是几乎所有神经退行性疾病的共同病 理特征，其介导的神经炎性反应在疾病的发生发展中起着重要作用。因此，抑制 小胶质细胞的炎性反应可能是攻克神经退行性疾病的重要突破口。 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)能够影响细胞组蛋白和其他染色质蛋白 的乙酰化水平，是基因表达的重要调节剂之一。大量研究表明，HDACI对中枢神 经系统疾病有着潜在的治疗意义。苯丁酸钠f4．PBA)是一种短链脂肪酸类的 HDACI，近些年的研究表明4-PBA在亨廷顿病和帕金森病模型中有神经保护作用， 能减轻阿尔茨海默病转基因小鼠的认知障碍，减少脑缺血模型中神经元的凋亡。 4-PBA对离体培养小胶质细胞的作用结果表明其对缺氧诱导的炎性反应有抑制作 用，但4-PBA对小胶质细胞是否有毒性，在整体情况下是否能抑制小胶质细胞活 化还需要进一步的研究。 方法： 使用脂多糖LPS诱导体内外小胶质细胞活化，新生24h SD大鼠原代小胶质细 胞纯化培养和原代混合胶质细胞培养，Griess试剂法测定原代小胶质细胞培养液炎 性介质一氧化氮(NO)的含量；MTT法检测原代小胶质细胞的生存能力；免疫荧 光检测小胶质细胞形态；WeStemBlot检测原代混合胶质细胞中Iba．1蛋白表达水 万方数据 大连医科大学硕士学位论文平。整