HGFTGFβ1在风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化的作机制研究.docx

学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名(手写)： 导师签名(手写)： 狻堑年生月丝日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 (必威体育官网网址的学位论文在解密后适用本授权书) 作者签名(手写)： 导师签名(手写)： 一一丝进年』月毕日 HGF／TGF HGF／TGF 13 1在风湿性心脏病心房颤动患者心房纤维化的作用机制研究 研究生：陈建泉 导师：许春萱教授． 中文摘要 目的肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子p1(TGFpl)干预体外培养的 人心房成纤维细胞后，检测细胞增殖，细胞结缔组织生长因子(CTGF)、0【．平滑 肌肌动蛋白(a．SMA)mRNA和蛋白的表达及胶原、明胶酶分泌，旨在首次观 察TGFl3l、HGF正负调控风湿性心脏病(RHD)心房颤动(AF)患者心房成纤 维细胞纤维化与AF发生和维持的关系。 方法20例风湿性心脏病(RHD)接受换瓣手术患者，收集受试对象一般临 床资料：年龄，性别，心功能，左心房内径(LAD)，AF持续时间等。其中窦性 心律(SR)组10例；慢性AF(CAF)组10例。无菌取右心耳组织，体外分离 培养人心房成纤维细胞，HGF和TG邛l干预并实验分组，WST-1检测细胞增殖， 半定量逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞I型胶原、明胶酶(MMP．2)、 TIMP．2、TGFl31、CTGF和0【．SMA的mRNA含量，免疫荧光、免疫印迹 (Western．Blot)检测各组细胞CTGF、0【．SMA蛋白表达水平。 结果(1)体外成功分离培养人心房成纤维细胞，经细胞免疫荧光鉴定证实。 (2)TGFl3l呈剂量依赖性和时间依赖性促人心房成纤维细胞增殖， 10ng／mlTGF[31、48h作用最为显著。HGF呈剂量依赖性和时间依赖性抑制人心房 成纤维细胞增殖，100ng／mlHGF、48h作用最为显著。而且HGF部分拮抗TGFl3i 促增殖作用。(3)与SR组比较，CAF组左房明显扩大j心房成纤维细胞I型 胶原、MMP．2、TGF]31、CTGF和Q．SMA的mRNA水平明显增加，TIMP．2的 mRNA水平明显减少；CAF组I型胶原、MMP．2的mRNA相对水平与LAD、 AF持续时间呈正相关，TGFl31、CTGF和0【．SMA的mRNA水平与I型胶原和 MMP．2的mRNA表达水平呈明显正相关；MMP．2的mRNA水平与TIMP．2的 mRNA水平呈明显负相关。(4)与SR组比较，CAF组心房成纤维细胞CTGF、 01．SMA蛋白表达水平均明显增加。CTGF的蛋白水平与旺．SMA蛋白水平呈明显 正相关，与LAD、房颤持续时间呈明显正相关。(5)TG邛1干预后，促进CAF 组心房成纤维细胞I型胶原、MMP．2、CTGF、o【．SMAmRNA表达及CTGF、a．SMA 2 蛋白表达，抑制TIMP．2 蛋白表达，抑制TIMP．2 mRNA表达。HGF干预后，抑制I型胶原、MMP．2、 CTGF、a．SMA的mRNA表达及CTGF、a．SMA的蛋白表达，促进TIMP．2 mRNA 表达。(6)HGF部分抑制CAF组心房成纤维细胞TGF]31mRNA的表达水平，HGF 可能通过部分抑制CTGF表达，拮抗TGF[3l的作用。 结论AF患者心房成纤维细胞中TGF[3l、CTGF表达增加促进I型胶原、 MMP．2和Q—SMA分泌，导致心房结构重构，可能与房颤的发生和维持有关。 TGFpl和HGF分别通过促进和抑制心房成纤维细胞增殖，上调和下调细胞 CTGF、Q．SMA表达及胶原和MMP．2分泌，促进和抑制心房纤维化。HGF可能 通过抑制心房成纤维细胞CTGF表达，拮抗TGFfll促心房纤维化作用。 关键词心房颤动心房纤维化心房成纤维细胞胶原肝细胞生长因子 转化生长因子 结缔组织生长因子0【平滑肌肌动蛋白 Study Study on the Role of Hepatocyte Growth Factor and Transforming Growth Factor—p1