HIF1α基因多态性与胰腺癌易感关系的研究.docx

天津医科大学硕士学位论文中文摘要 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的 胰腺癌是目前已知的恶性度最高、预后最差的实体瘤。尽管包括手术和放化 疗在内的治疗手段取得了明显的进展，但胰腺癌的预后并未获得明显改善， 五年的存活率只有3％左右。乏氧是实体肿瘤普遍的生长微环境，乏氧状态 下肿瘤进展较快是临床治疗中所面临的难题。低氧诱导因子．1(hypoxia inducible factor l，HIF．1)是参与肿瘤乏氧的一个重要的调控因子，是由a亚 单位和p亚单位构成的异源二聚体，转入细胞核内，参与细胞增殖、糖代谢、 细胞存活等多种生理功能。临床病理学资料显示，约70％胰腺导管腺癌组织 高表达HIF．1。最近研究报道了HIF．1a序列中存在着两个重要的多态位点， 即C1772T和G1790A，这两个多态位点主要位于HIF．1a的氧依赖降解区域。 在乏氧情况下，由于HIF—la降解受阻，可引起下游靶基因的过表达，进而影 响肿瘤的预后。HIF．1a基因多态性与结肠癌，肾细胞癌，头颈细胞瘤，膀胱 癌，乳腺癌，子宫颈癌和子宫内膜癌关联性的研究均有报道，而近年来，HIF．1a 在胰腺癌的形成和进展过程中发挥的作用引起了广泛关注。本研究旨在探讨 HIF—la基因多态性和胰腺癌易感性的关系，以及HIF．1a基因多态性与HIF．1a 表达的关系，为胰腺癌患者的早期诊断和治疗提供新的途径和靶点。 方法 1．样本的纳入及采集 采用以医院为基础的病例．对照研究方法，以263例胰腺癌患者和271例 正常对照为研究对象。病例组为2001年至201 1年在天津医科大学附属肿 瘤医院住院的经细胞学证实为胰腺癌的患者；对照组为同时期在天津医科 大学附属肿瘤医院进行体检的271位正常居民。 2．目的基因的采集、扩增及测序 采集病例和正常对照人群的静脉血及部分病例组石蜡组织，DNA的抽提 采用DNA提取试剂盒。应用聚合酶链反应(PCR)和基因测序技术对各 样本C1772T和G1790A两个多态位点基因型进行鉴定。 3．HIF．1a免疫组化 收集95例胰腺癌石蜡组织切片，用免疫组织化学方法检测HIF．1a基因在 胰腺癌组织中的表达水平。 天津医科大学硕士学位论文4．数据统计 天津医科大学硕士学位论文 4．数据统计 研究对象基因型与Hardy-Weinberg平衡的符合程度、组间基因型与等位 基因频率的比较采用双侧x 2检验，采用非条件Logistic回归模型对胰腺 癌的危险因素进行单因素和多因素分析，估计比值比(OR)及其95％置 信区间(CI)。用Kaplan-Meier方法进行生存分析，不同基因型之间生存 率差异通过log-rank检验。同时按相关因素分层分析，分析基因型与环境 因素间的交互作用。HIF．1a表达与基因型进行相关性检验。 结果 1．HIF．1a基因中C1772T和G1790A位点的基因型频率病例组显著高于对照 组(21％VS 11％，25％VS 8％，PO．01)。Logistic回归分析结果显示：C1772T SNP可增加胰腺癌的患病风险(OR=2．156，95％CI：1．324．3．511，PD．酊)。 同时，G1790A SNP也与胰腺癌的高风险密切相关(OR=3．716，95％CI： 2．2 1 3-6．238，PO．01)。 2．Kaplan．Meier生存分析发现C1772T和G1790A位点不同基因型对患者的 生存时间没有影响。Logistic回归分析吸烟与两基因位点的基因型的关系， 在吸烟组，两基因型的多态性并不构成胰腺癌的危险因素∽n∞)。分析 临床病历资料发现，血清CAl99的水平及肿瘤大小与G1790A的SNP 位点的改变成正相关，而与G1790A SNsP位点的改变无关。 3．免疫组化染色显示：HIF—la在胰腺癌组织中高表达，且与肿瘤大小、淋 巴结转移和TNM分期成正相关。其中G1790A SNPs位点与HIF．1a的高 表达成正相关(PO．OI)，而C1772T SNPs与HIF．1a的表达无明显相关 性。 结论 在HIF．1a基因中C1772T和G1790A的SNPs增加了胰腺癌的易感性，其中 G1790A的SNPs与肿瘤中HIF．1a的表达及肿瘤的进展密切相关。 关键词：HIF．1a基因多态性胰腺导管腺癌CAl9．9 II 天津医科大学硕士学位论文Abstract 天津医科大学硕士学位论文 Abstract objeetive Pancreatic cancer is the most malignant and the worst of the highest prognosis solid tumor．Despite improvement of therapeutic methods inc