COPD与皮细胞间质转化相关性研究-内科学专业毕业论文.docx

发现Slc9a2、Foxjl及Gif在两组中差异无统计学意义(PO．05)，Chrml、 发现Slc9a2、Foxjl及Gif在两组中差异无统计学意义(PO．05)，Chrml、 Sprr2b、Ragl、Dusp5、Cldn2、Cldn22、Scin差异有统计学意义(PO．05)， Morc3、Rela，mktl、Pik3rl，IL6ra，Myhl4、Tpm3、Crabp2、Sprr2a2、 Lyn、Srrm4、C／EBP、Gabarap、Elkl、Hk2、Tjapl、Strada两组间有明显 差异(PO．01)，选取差异明显的myhl4作为COPD相关基因进行后续实 验。6、CSE细胞毒性试验：对不同CSE浓度刺激24h的16HBE细胞进行 MTT法检测各组细胞活性，在CSE浓度≤2．5％时，细胞活性降低不明显， 差异无统计学意义(PO．05)，当CSE浓度大于2．5％时，细胞活性出现明 显下降(PO．01)。故选用2．5％CSE进行后续细胞实验。7、实时荧光定 量PCR：myhl4在小鼠COPD模型组中相对mRNA含量(RQ值)较对照 组下降(PO．05)，CSE对16HBE细胞不同时间刺激(8h、24h)组中myhl4 mRNA水平均较对照组下降(PO．01)，CSE 8h及24h刺激组间存在差异， 差异具有统计学意义(PO．05)。8、Dot blot、Western blot结果及相关性 分析：Dot blot结果显示，COPD模型组myhl4蛋白表达水平较对照组下 降(PO．05)，Western blot结果显示模型组中c【．SMA及collagen I蛋白表 达水平均较对照组升高(PO．05)；相关性分析显示模型组中蛋白表达水 平上myhl4与0【-SMA呈负相关(r=-0．833，P0．05)，与collagen呈负相 关(r=．0．953，P0．01)。16HBE细胞经CSE刺激(8h、24h)后，Dot blot 显示myhl4在蛋白表达水平上均较对照组明显下降(PO．01)，CSE 8h 及24h刺激组间存在差异性，差异具有统计学意义(PO．05)。9、16HBE 细胞中myhl4免疫荧光检测：绿色荧光为myhl4在细胞中的阳性表达， myhl4表达于细胞胞浆内，CSE刺激组(8h，24h)较对照组荧光表达明 显减弱(PO．01)，不同CSE刺激组间存在差异，且差异存在统计学意义 万方数据 (P0．05)。结论：1、CSE联合LPS滴鼻可成功构建小鼠COPD模型。2、COPD (P0．05)。 结论：1、CSE联合LPS滴鼻可成功构建小鼠COPD模型。2、COPD 中存在EMT现象的发生。3、myhl4可在人支气管上皮细胞及小鼠支气管 上皮细胞表达，且在小鼠COPD模型及经CSE刺激的16HBE细胞中存在 mRNA及蛋白水平下降。4、myhl4可能在COPD发生EMT中起着重要作 用，上调myhl4的药物或许能抑制EMT的发生，这使得myhl4可能会成 为COPD等疾病药物治疗的新靶点。 关键词：COPD；动物模型；myhl4；EMT；CSE 万方数据 The The study on the relationship between COPD and epithelial-mesenchymal transition Abstract Objective：COPD is a common chronic respiratory system disease，with high prevalence，high mortality characteristics，and complex pathogenesis．It may be associated with multiple gene variants．Establishment of animal model for understanding the pmhogenesis of COPD is particular important．In the study, we aim to explore and build a new mouse model of COPD，and evaluate the model in many ways，such as general condition of the mice，other pathological changes in the lung tissue．At the same time we try to observe associated markers(E—cadherin，a-SMA and Collagen I)of EMT in COPD model and its cont