COX2及前列腺产物在大鼠肝脏移植缺血再灌注损伤中的作用研究.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 第2 第2页共55页兰州大学硕士研究生学位论文 关于学位论文使用授权的声明 本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归 属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定， 同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版， 允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存和 汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相 关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为兰州大学。 必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定。 蝴樾硌燧名：M叫 第3 第3页共55页兰州大学硕士研究生学位论文 摘 要 目的：探讨环氧合酶2(cyclooxygenase一2、Cox一2)及其前列腺素产物 TXA。／PGI。在大鼠肝移植缺血再灌注(LT-IR)损伤中的表达规律及作用。为临床 治疗和改善移植肝脏缺血再灌注损伤提供理论基础。 方法：雄性sD大鼠随机分为6组：E1对照组、E2肝脏缺血再灌注损伤组、 E3特异性Cox一2抑制剂+缺血再灌注损伤组、E4肝脏移植组、E5特异性Cox-2 抑制剂+肝脏移植组，手术后或门静脉开放后3h、6h、12h、24h留取标本保存待 检测，E6组大鼠肝脏切取后在无钙D-Hanks液中保存lh，3h后留取标本检测。 放射免疫法(Radio—immunity assay)检测6_Keto—PGF—la、TXB2(分别为PGl2、TX 的稳定代谢产物)在血清及组织中的水平。两步法逆转录．聚合酶链式反应RT—PCR 检测各组肝组织中Cox-2mRNA的表达；酶联免疫吸附试验ELISA法检测TNF—a 在冷保存肝脏组织中的表达；免疫组化法检测Cox一2在组织中的定位及表达；脏 染色确定组织损伤程度并统计。 结果： 1．血清AST、ALT水平：E2、E3、E4、E5与El组比较明显升高(PO．05)，而 在E3及E5中明显低于E2和E4组，且E4组明显高于E2组(PO．05)； 2．Cox-2免疫组化显示阳性细胞主要是分布于汇管区肝窦内皮细胞、肝细胞及 巨噬细胞胞内；E2、E3、E4、E5组中Cox-2mRNA表达水平明显高于对照组E1 组；术前给予cox-2抑制剂的大鼠Cox-2mRNA表达水平明显降低。免疫组化 显示给予Cox-2抑制剂的大鼠肝脏内Cox-2表达明显低于未给抑制剂组大 鼠；在冷保存lh后肝组织中表达明显增加，3h后的表达较1h组有所增加 (PO．05)。 3．各组6-Keto-PGF-la、TXB2水平均比对照组明显升高(PO．05)、且以TXB2 升高显著，TXB2／6一Keto—PGF一1a比值升高，E3和E5组术前给予Cox-2抑制 剂后6-Keto—PGF一1a、TXB2水平均明显降低，以TXB2降低较明显， TXB2／6一Keto—PG卜la、比值降低或恢复平衡。肝移植组E4组TXB2、 6一Keto-PGF一1a明显高于肝脏缺血再灌注组E2组；E6组中TXB2、 6-Keto-PGF-la在冷保存1h、3h后肝组织中含量明显增加，但lh、3h相比 数据缺乏统计意义。 第4 第4页共55页兰州大学硕士研究生学位论文 4．皿染色见移植组E4的损伤重于缺血再灌注损伤组E2，E3及E5给予Cox一2 抑制剂能明显改善移植肝脏的病理损害(P0．05)。冷保存对肝细胞的损伤表 现以细胞水肿为主，冷保存3h后肝细胞坏死有所增加。 5．TNF—a在冷保存lh后的肝脏组织中表达即可增加，但在冷保存3h后并未见 进一步增高(PO．05)。 结论：肝移植缺血再灌注损伤的发生是在冷保存性损伤的基础上进一步加重 的再灌注性损伤；Cox-2在肝移植缺血再灌注损伤中具有损伤性作用，抑制Cox-2 的高表达可通过纠正其下游的TXA：／PGI。系统失衡而改善肝脏的微循环，减轻移 植肝脏的损伤。TXA。／PGI。及TNF—a在移植肝脏冷保存时的变化可能对冷保存性 损伤具有重要的作用。 关键词：环氧合酶2血栓素前列环素缺血再灌注损伤肝脏移植 4 第5 第5页共55页兰州大学硕士研究生学位论文 ABSTRACT Role of cyclooxygenase-2 and PGIz／TXA2 on ischemia·reperfusion inj ury after liver transplantation 【Abstract】 Objective：Study the role of cyclooxygenase-2(Cox-2)and PGl2／TXA2 on ischemia—reperfusion injury after liver transplantation in rat，and to i