HP-PRRSV GP5蛋白在酵母中的高效分泌表达及抗体检iELISA方法的建立.docx

密级： 密级： 论文编号： 中国农业科学院 HP．PRRSV GP5蛋白在酵母中的高效分泌 表达及抗体检测iELISA方法的建立 High-level Expression of GP5 Protein of HP．PRRSV in Pichia Pastoris and Development of Indirect ELISA for Detection of Antibody against GP5 硕士研究生：郝立沙 指导 教师： 涂亚斌副研究员 申请学位类别： 兽医硕士 专业领域名称： 兽医学 培养单位： 哈尔滨兽医研究所 研究生院 20 1 5年5月 万方数据 洲Y 洲Y ㈣ZⅢ7I ㈣8 mⅢm7， 帆3 叭¨叭7 Ⅲ0 Secrecy： No． Chinese Academy of Agricultural Sciences Dissertation High—level Expression of GP5 Protein of HP．PRRSV in Pichia Pastoris and Development of Indirect ELISA for Detection of Antibody against GP5 M．S．Candidate：Hao Li—sha Supervisor：Associate Prof．Tu Ya．bin Degree：Master of Veterinary Medicine Specialty：Veterinary Microbiology and Molecular Biology May 201 5 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了 明确的说明并表示了谢意。 研究生签名： 时间：2啦年／月弓日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不 问媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研究生签名： 蚴 时间：知心年乡月弓日 导师签名： 多：多硎． 时间：j啦年么月弓日 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 论文题目 HP．PRRSV GP5蛋白在酵母中的高效分泌表达及抗体检测iELISA方法的建立 兽医微生物及其分 论文作者 郝立沙 专业 兽医 研究方向 子生物学 指导教师 涂亚斌 培养单位(研究所) 哈尔滨兽医研究所 硕(博) 姓名 职称 单 位 专业 签名 导师 硕导口 ＼＼ 阅 盲评 博导口 ＼ 盲评 评 博导口 硕导口 人 硕导口 ＼＼ 盲评 博导口 答 辩 硕导口 聊缈 主 周恩民 教授 西北农林科技大学 预防兽医学 席 博导团 隋广超 教授 硕导口 东北林业大学 基础医学 M侈 博导团 华育平 教授 硕导口 东北林业大学 预防兽医学 己懈 放 獭 博导团 口 硕导口 蔡雪辉 研究员 哈尔滨兽医研究所 预防兽医学 z鳓 博导团 么 辩 副研究 硕导团 何希君 哈尔滨兽医研究所 预防兽医学 员 博导口 委 硕导口 贝 博导口 硕导口 博导口 硕导口 博导口 会议记录(秘书) 王刚 万方数据 摘要猪繁殖与呼吸综合征(Porcine 摘要 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼 吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染病，给世界各国带来了严重的经济损失。而高致 病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP．PRRSV)是PRRS经典毒株的变异毒株，自2006年爆发以来， 给养殖场造成的损失更是毁灭性的。因此，建立快捷、敏感的诊断方法对提前预防该疾病，及时 采取控制措施具有重要意义。GP5蛋白作为PRRSV病毒的主要结构蛋白，成为血清学检测的重要 目标蛋白。巴斯德毕赤酵母作为一种高效表达外源蛋白的真核表达系统，己被广泛应用。本实验 将通过毕赤酵母表达系统高效分泌表达去跨膜区的GP5(dGP5)蛋白，并基于该蛋白建立检测GP5 蛋白抗体的间接ELISA方法。 首先，本研究主要通过密码子的偏嗜性、AT富含区、GC含量调整等对m—PRRSV HuN4 G